🎨 染色方法大比拼 溴酚蓝溶液:将0.05g溴酚蓝溶于1ml乙醇,得到5%溴酚蓝溶液。将分离胶AB液按1:1混合后,加入溴酚蓝,其他步骤正常进行。 优点:便宜易得,自制loading buffer的实验室都有溴酚蓝,不需要额外购买商品,上样清晰可见。 缺点:溴酚蓝在上层胶中会晕染渗开,形成蓝色模糊感;在电泳过程中会迁移。 超...
使用方法: 1、 将电泳后的 PAGE 胶取下放入塑料容器中,加入适量染色液(以刚刚覆盖过胶面为适)。 2、 摇床上常温摇动10-20分钟。 3、 观察结果。 特点 · 1.室温下10min内可显现蛋白条带,无需脱色。 · 2.无毒无刺激气味。 · 3.灵敏度高,ng级蛋白,条带清晰。 注意事项: 1、常规染色所需的漂洗...
在现在的蛋白染色方法中,考马斯亮蓝染色法是最为常用的[2],虽然这种方法染色时间较长,但是其染色效果好,又比较简便,且银染法染色虽然灵敏度很高[3],但是实验试剂盒价格较高,实验操作步骤繁杂,实验时间较长,需要投入大量金钱和精力。所以在本实验中选择进行固定和染色,再脱色的方法,但由于条件有限,并没有使用加热...
1、首先sdspage结束后，每块凝胶加入100毫升去离子水，微波加热30秒，水平摇床震荡漂洗5分钟，重复三次。2、然后每块凝胶加25毫升染色液，微波加热15秒，水平摇床震荡。3、最后蛋白条带会在10分钟开始逐渐显现，在1小时内达到百分之90染色效果。
1979 年 Switzer 和 Merril 等首先在 “Analytical Biochemistry” 上介绍了比考马斯亮蓝染色灵敏 2 个数量级的银染色方法,它可以检测小至 0.38 ng/mm2的牛血清白蛋白。这个方法接着在 1980 年由 Oakley 等进一步发展以达到简化程序和低消耗的目的。有关这个方法的研...
SDS-PAGE快速染色脱色方法 在用SDS-凝胶电泳法测定蛋白质分子量时，应注意以下几个问题：1．如果蛋白质-SDS复合物不能达到1.4克SDS/1克蛋白质的比率并具有相同的构象，就不能得到准确的结果。影响蛋白质和SDS结合的因素主要有以下3个：（1）二硫键是否完全被还原：只有在蛋白质分子内的二硫键被彻底还原的情况...
1. 电泳结束后取出凝胶，放置容器中倒入染色液以覆盖凝胶为宜，一般30ml即可。2. 放置摇床染色2-10分钟即可。染液呈酸性，请勿徒手触碰染液，如蛋白量较低，胶过厚，可适当延长染色时间。染液可重复利用3次，随着使用次数的增加，染色速度会下降，但不影响灵敏度。3.染色结束后，无需脱色液洗脱，只需将蛋白凝胶...
摘自Takara商品名目--试验室常规试剂配制方法 TEMED TEMED原液直接使用 考马斯亮蓝R-250染色液 【组分浓度】0.1%(w/v)考马斯亮蓝R-250,25%(v/v)异丙醇,10%(v/v)冰醋酸 分别胶 分别胶 考马斯亮蓝R-250 1.0g 0.4g 异丙醇 250ml 100ml 搅拌溶解,可用甲醇替代 冰醋酸 100ml 40ml 搅拌均匀 去离子水 65...
sds-page 试剂配制 SDS-PAGE 试剂配制 凝胶脱色染色方法：溶液1：无水乙醇250mL，冰醋酸50mL，水200mL；溶液2：无水乙醇50mL，冰醋酸37.5mL，水437.5mL；溶液3：0.25g考马斯亮蓝R-250 溶于100mL 95%乙醇中，滤纸过滤，待用。电泳结束，取出胶放在胶盒中，加约50mL溶液1，微波炉加热1min，摇床摇10-20nin；...