SDS-PAGE 银染步骤1. 电泳完成后,用超纯水洗胶2次,每次洗涤5分钟。 2. 固定:将凝胶浸泡在 25 ml 的固定液中,固定液充分覆盖胶。放于摇床上室温摇动 15 分钟。更换固定液,重复一次。固定液的配制:超纯水:乙醇:冰醋酸=6:3:1. 3. 固定完成后,配制 10%乙醇,洗胶 2 次,每次洗涤 5 分钟。 4. 再用超...
银染后的凝胶可以通过凝胶成像系统或扫描仪转化为照片,或者可以直接用手机拍摄。 在银染实验中,纯水(去离子水)水质非常重要,对实验成功与否起着关键性的作用。有用户在实验中忽略了这一点,纯水水质不佳,导致氯离子含量超标,浸泡时出现硝酸银沉淀,沉淀在胶上,最后显影的时候看到的是一片花花的乱象,影响了染色效果。
SDS-PAGE电泳操作流程—含考染银染碘染.docx,1 SDS- 操作流程——考染 1、预备溶液 30% 30%聚丙烯酰胺溶液 30%〔w/v〕Acrylamide 【组分浓度】 各种组分名称 各种组分名称 30%Acr-Bis(29:1) 29%Acrylamide( 丙烯酰胺) 1%BIS(N,N’-亚甲丙烯酰 胺) 配制不同体积所需各成分的
3、注意事项 胶脱色不能脱的太久,虽然越脱越清楚,但脱的太久了,弱带就看不见了,胶也会变的失真,这样的胶照出的照片是很难被接受的。如果样品条带或点不是很浓,就不可以脱太久。但如果要拍照,最起码要保证底色脱完全,要不然照片效果也不会好的。 广州如期生物技术有限公司成立于2016年,始终以探索科学、服...
银染 试剂: 1、1%乙酸 2、显影液:2.5%的碳酸钠和0.02%甲醛的水溶液,新鲜配置 3、30%乙醇 4、固定液:Ethanoh:glacial acetic acid:H2O(30:10:60) 5、硝酸银溶液:现配现用,将20%AgNO3稀释成0.1% 步骤: 1、将凝胶泡在至少5倍体积的固定液中,室温下4-12h 2、去掉固定液,将胶泡在至少5倍体积的30%乙醇...
(三)银染:(每步戴手套) 1. 少量水洗胶二次,固定30min以上。 2. 少量水洗胶二次,浸泡液处理30min。 3. 水洗五分钟一次,共三至四次。振荡,去除戊二醛的非特异性结合。 4. 银溶液染色20min。 5. 少量水洗胶,显色液显色轻摇,直至出现清晰条带(若显色液变黑...
可将凝胶存放在含20%甘油的水中。银染 试剂：1、1%乙酸 2、显影液：2.5%的碳酸钠和0.02%甲醛的水溶液，新鲜配置 3、30%乙醇 4、固定液：Ethanoh：glacial acetic acid:H2O （30:10:60)5、硝酸银溶液：现配现用，将20% AgNO3稀释成0.1% 步骤：1、将凝胶泡在至少5倍体积的固定液中，室温下4-12h ...
(1)考马斯亮蓝法,在SDS-PAGE后,凝胶的固定和染色时间应比常规PAGE的长1倍左右,或用多倍体积染色液染色,以排除SDS的影响。 (2)银染法,在电泳后染色之前,必须将凝胶多次漂洗,以除去SDS。 4.影响分离结果的因素 缓冲系统 在SDS对蛋白质的助溶作用以及负电荷的包裹作用影响下,蛋白质的分离仅依据亚基的分子大小,...
测定蛋白质分子量的方法有很多,SDS-PAGE是主要方法之一,也是实验室使用最普遍的一种。在SDS-PAGE中,已知分子量的标准蛋白质和未知样品同时电泳。染色后,根据标准蛋白质的相对迁移率和分子量的对数,可得到一条标准曲线,利用未知样品的相对迁移率可在标准曲线上求得其分子量。另外,SDS-PAGE法可分为还原电泳和非还原...
SDSPAGE原理和流程操作步骤详解 (2)根据缓冲系统和凝胶孔径的不同 连续电泳 不连续电泳 (3)根据电泳的形式 圆盘电泳 垂直电泳 平板电泳 水平电泳 SDSPAGE原理和流程操作步骤详解 SDSPAGE原理和流程操作步骤详解 SDSPAGE原理和流程操作步骤详解 SDSPAGE原理和流程操作步骤详解 2、操作 (1) 制备分离胶 (2) 制备积层...