SDS-PAGE 银染步骤1. 电泳完成后,用超纯水洗胶2次,每次洗涤5分钟。 2. 固定:将凝胶浸泡在 25 ml 的固定液中,固定液充分覆盖胶。放于摇床上室温摇动 15 分钟。更换固定液,重复一次。固定液的配制:超纯水:乙醇:冰醋酸=6:3:1. 3. 固定完成后,配制 10%乙醇,洗胶 2 次,每次洗涤 5 分钟。 4. 再用超...
银染后的凝胶可以通过凝胶成像系统或扫描仪转化为照片,或者可以直接用手机拍摄。 在银染实验中,纯水(去离子水)水质非常重要,对实验成功与否起着关键性的作用。有用户在实验中忽略了这一点,纯水水质不佳,导致氯离子含量超标,浸泡时出现硝酸银沉淀,沉淀在胶上,最后显影的时候看到的是一片花花的乱象,影响了染色效果。
SDS-PAGE操作流程一一银染1、固定:25mL醋酸,100mL甲醇,加入125mL超纯水,对凝胶中蛋白质进行固定60min(固定时间可延长,加一步水洗)。2、浸泡:75mL甲醇,0.5g无水硫代硫酸钠(强还原性),17g醋酸钠(28.18g三水合醋酸钠),加入165mL超纯水,(每10mL溶液中加入100uL稀释十倍的甲醛),30min。3、水洗:用超纯水洗三次...
3、注意事项 胶脱色不能脱的太久,虽然越脱越清楚,但脱的太久了,弱带就看不见了,胶也会变的失真,这样的胶照出的照片是很难被接受的。如果样品条带或点不是很浓,就不可以脱太久。但如果要拍照,最起码要保证底色脱完全,要不然照片效果也不会好的。 广州如期生物技术有限公司成立于2016年,始终以探索科学、服...
步骤: 1、将凝胶泡在至少5倍体积的固定液中,室温下4-12h 2、去掉固定液,将胶泡在至少5倍体积的30%乙醇中,室温30min,shaking,并重复1次(1h) 3、弃去乙醇,加入10倍体积的去离子水,室温10min,重复1次(20min) 4、弃去水,加入5倍体积硝酸银溶液,室温30min ...
SDS-PAGE银染实验 一、实验原理 银染是一种检测聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法,其原理是银离子在碱性pH环境下被还原成金属银,沉淀在蛋白质的表面上显色。 二、实验目的 银染的灵敏度很高,可染出胶上低丰度的蛋白质 三、实验结果展示 四、服务内容及流程 ...
(三)银染:(每步戴手套) 1. 少量水洗胶二次,固定30min以上。 2. 少量水洗胶二次,浸泡液处理30min。 3. 水洗五分钟一次,共三至四次。振荡,去除戊二醛的非特异性结合。 4. 银溶液染色20min。 5. 少量水洗胶,显色液显色轻摇,直至出现清晰条带(若显色液变黑...
SDSPAGE原理和流程操作步骤详解 1、SDS 阴离子去污剂变性剂助溶性试剂断裂分子内和分子间的氢键分子去折叠破坏蛋白质分子的二级和三级结构 SDSPAGE原理和流程操作步骤详解 2、强还原剂巯基乙醇（β-mercaptoethanal）二硫苏糖醇（dithiothreitol，DTT）使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂 SDSPAGE原理和流程操作步骤详解 SDS...
SDS-PAGE(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis)测定蛋白质分子量,简便、快速且重复性好,是一种常用的蛋白质分子量测定方法。广州如期生物技术有限公司提供基于SDS-PAGE或质谱的蛋白质分子量测定服务。 SDS-PAGE SDS-PAGE即十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳,是一种间断的电泳系统,通常用于分离分子量...
16.银染显色液 取1% 柠檬酸2.5ml、37% 甲醛270μl,加水至500ml。 17.终止液(10% 乙酸) 取乙酸100ml,加水至1L。 三.操作方法 1.夹心式垂直电泳槽使用方法 1)清洗部件:用去污剂清洗长短玻璃板、胶模框及样品梳,用自来水彻底冲洗,再用去离子水不洗净,放置晾干或用滤纸擦干(注意不要留下纤维)待用。如有必...