2、按照上面配方制SDS-PAGE凝胶,安装好电泳仪,在槽中加入电极缓冲液。 3、按一定顺序在加样孔中加入样品。 4、打开电源将电压调到80v,待样品跑过压缩胶后将电压调到120v至样品电泳到胶底部为止。 5、将凝胶小心取下放入容器中,加入染色液,用摇床摇2-3h 6、待条带清晰后倒出染色液,加入脱色液过夜 7、将脱色...
SDS-PAGE电泳溶液的配置 1、5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 剂试 浓度 重称 备注 Tris 0.125 M 15.1g 加入800 ml的双蒸水溶解,定容至1 L,室温保存 Glycine甘氨酸() 1.25 M 94g SDS )0.5 %(W/V 5g 、染色液2 试剂 浓度 称重 备注 乙醇 V/V25 %() 250 mL 双蒸水溶解,定容至1 L,滤纸过滤后,室温保存...
将胶架放入电泳槽中,加入电泳液没过胶板。浓缩胶电压选在80～110V,分离胶电压选择在160～200V。直至溴酚蓝前沿指示剂行至电泳槽下端停止。 通常浓缩胶耗时约1.25h,分离胶耗时0.75h 5. 染色 电泳结束后,将胶板取出,用考马斯亮蓝染色,室温下10min以上 重复使用的染色液需要延长染色时间 6. 脱色 将胶体从染色液...
考马斯亮蓝脱色液 10 L: 于10 L洁净塑料桶内装入工业乙醇2 L,冰醋酸500 mL,加入去离子水至10 L,混匀,室温可放置12个月以上。 蛋白电泳凝胶的快速染色和脱色: 凝胶的染色和脱色于合适体积的塑料盒中进行。电泳后的凝胶加入染色液(以刚没过凝胶即可),于...
5×SDS-PAGE电泳缓冲液 1L Tris 15.1g Glycine(甘氨酸) 94g SDS 5g 将以上药品用去离子水溶解后定容到1L,常温保存。工作时用的是1×SDS-PAGE电泳缓冲液。 九、考马斯亮蓝R-250染色液的配制 1、往1g考马斯亮蓝R-250中加入250ml异丙醇,在磁力搅拌器上搅拌六小时以上; ...
SDS-PAGE电泳溶液的配置 1、5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 试剂 浓度 称重 备注 Tris 0.125 M 15.1g 加入800 ml的双蒸水溶解, 定容至1 L,室温保存 甘氨酸(Glycine) 1.25 M 94g SDS 0.5%(W/V) 5g 2、染色液 试剂 浓度 称重 备注 乙醇 25%(V/V) 250 mL 双蒸水溶解,定容至1 L,滤纸过滤后,室温保存 ...
SDS-PAGE 试剂配制 凝胶脱色染色方法：溶液1：无水乙醇250mL，冰醋酸50mL，水200mL；溶液2：无水乙醇50mL，冰醋酸37.5mL，水437.5mL；溶液3：0.25g考马斯亮蓝R-250 溶于100mL 95%乙醇中，滤纸过滤，待用。电泳结束，取出胶放在胶盒中，加约50mL溶液1，微波炉加热1min，摇床摇10-20nin；倒掉溶液1，加入溶液...
若希望更快地看到结果，可以适当加热脱色液，这样通常只需十分钟即可完成脱色。完成脱色后，即可进行照胶和分析。蛋白胶的分析可以采用灰度法进行对比，或者与标准蛋白进行对比，以确定各蛋白条带的大小和含量。五、SDS-PAGE电泳的应用 分子量估测：通过SDS-PAGE电泳，可以大致估算出蛋白质的分子量大小。纯度评估：该...
本发明公开了一种SDS-PAGE电泳凝胶脱 色液的配方及快速脱色的方法,配方为:250ml 乙醇,75ml冰乙酸,纯水定容到1000ml。方法 为:取适量上述脱色液,将胶浸没后,在微波炉 内低火模式下加热1min,再静置15min后,更换 脱色液,重复以上步骤两次就可以完成脱色,整 ...