2、按照上面配方制SDS-PAGE凝胶,安装好电泳仪,在槽中加入电极缓冲液。 3、按一定顺序在加样孔中加入样品。 4、打开电源将电压调到80v,待样品跑过压缩胶后将电压调到120v至样品电泳到胶底部为止。 5、将凝胶小心取下放入容器中,加入染色液,用摇床摇2-3h 6、待条带清晰后倒出染色液,加入脱色液过夜 7、将脱色...
SDS-PAGE电泳溶液的配置 1、5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 剂试 浓度 重称 备注 Tris 0.125 M 15.1g 加入800 ml的双蒸水溶解,定容至1 L,室温保存 Glycine甘氨酸() 1.25 M 94g SDS )0.5 %(W/V 5g 、染色液2 试剂 浓度 称重 备注 乙醇 V/V25 %() 250 mL 双蒸水溶解,定容至1 L,滤纸过滤后,室温保存...
SDS-PAGE电泳溶液的配置 1、5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 试剂 浓度 称重 备注 Tris 0.125 M 15.1g 加入800 ml的双蒸水溶解, 定容至1 L,室温保存 甘氨酸(Glycine) 1.25 M 94g SDS 0.5%(W/V) 5g 2、染色液 试剂 浓度 称重 备注 乙醇 25%(V/V) 250 mL 双蒸水溶解,定容至1 L,滤纸过滤后,室温保存 ...
SDS-PAGE 试剂配制 凝胶脱色染色方法：溶液1：无水乙醇250mL，冰醋酸50mL，水200mL；溶液2：无水乙醇50mL，冰醋酸37.5mL，水437.5mL；溶液3：0.25g考马斯亮蓝R-250 溶于100mL 95%乙醇中，滤纸过滤，待用。电泳结束，取出胶放在胶盒中，加约50mL溶液1，微波炉加热1min，摇床摇10-20nin；倒掉溶液1，加入溶液...
SDS-PAGE电泳所用溶液: 30 %聚丙烯酰胺溶液 (100 mL) 丙烯酰胺 (Arc) 29 g N,N’-亚甲双丙烯酰胺 (Bis) 1 g 用双蒸水定容至100mL,过滤备用,4?存放 丙稀酰胺29.2g,N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g,加入去离子水定容至100mL,pH值不能超过7.0,过滤于棕色玻璃瓶中4?贮存。 5×Tris-甘氨酸缓冲液 (1 L) ...
聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N'-亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(APS),N,N,N',N’-四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持物进行电泳。 2.1电泳缓冲液(1000ml配方) 2.2考马斯亮蓝染色液(1000ml配方) ...
SDS-PAGE、Native及2D电泳试剂配方第一章 SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳 1. 储存液 ① 2 M Tris-HCl(pH 8.8), 100ml 24.2g Tris + 50ml 蒸馏水+浓盐酸至 pH 8.8 (4ml),待室温+蒸馏水至 100ml。 ② 1 M Tris-HCl(pH 6.8), 100ml 12.1g Tris + 50ml 蒸馏水+浓盐酸至 pH 6.8 (8ml),待室温+...
染色液请倒入专用的回收容器内。以自来水小心地淋洗凝胶冲去剩余染料,然后倒入适量的脱色液,微波加热至刚沸腾后于染色摇床上摇动约10 min,倒掉脱色液,此时凝胶的蛋白条带即可看清。重复以上脱色步骤一次,即可看清电泳条带。扫描凝胶蛋白条带需要完全脱掉背景颜色,这...
SDS-PAGE 操作标准 2010.06.28 王红勋 一,电泳相关溶液的配制: 1,30%丙稀酰胺混合溶液(100ml): 丙稀酰胺 双丙稀酰胺 29g(实际可以为 29.2g) 1g (实际可以为 0.8g) 用水溶解定容到 100ml,过滤,4 摄氏度保存一个月. 2,5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液: 5× Tris base 甘氨酸 10%SDS(m/V) dH2O 定容至 100...