2、按照上面配方制SDS-PAGE凝胶,安装好电泳仪,在槽中加入电极缓冲液。 3、按一定顺序在加样孔中加入样品。 4、打开电源将电压调到80v,待样品跑过压缩胶后将电压调到120v至样品电泳到胶底部为止。 5、将凝胶小心取下放入容器中,加入染色液,用摇床摇2-3h 6、待条带清晰后倒出染色液,加入脱色液过夜 7、将脱色...
SDS-PAGE 试剂配制 凝胶脱色染色方法：溶液1：无水乙醇250mL，冰醋酸50mL，水200mL；溶液2：无水乙醇50mL，冰醋酸37.5mL，水437.5mL；溶液3：0.25g考马斯亮蓝R-250 溶于100mL 95%乙醇中，滤纸过滤，待用。电泳结束，取出胶放在胶盒中，加约50mL溶液1，微波炉加热1min，摇床摇10-20nin；倒掉溶液1，加入溶液...
SDS-PAGE电泳所用溶液: 30 %聚丙烯酰胺溶液 (100 mL) 丙烯酰胺 (Arc) 29 g N,N’-亚甲双丙烯酰胺 (Bis) 1 g 用双蒸水定容至100mL,过滤备用,4?存放 丙稀酰胺29.2g,N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g,加入去离子水定容至100mL,pH值不能超过7.0,过滤于棕色玻璃瓶中4?贮存。 5×Tris-甘氨酸缓冲液 (1 L) ...
变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)剖析 1)准备: 电泳玻璃板用双蒸水洗净,戴上手套再用无水乙醇擦抹玻璃板、梳子等并晾干,按说明安装好电泳装置。 2)%分别胶灌制 取一干净的20mL烧杯,分别加入: ddH2O4mL 30%贮备胶5mL 4分别胶缓冲液3mL 10% Aps(现配) 100%TEMED 轻轻旋转混匀溶液,用5mL移液器灌入玻璃...
聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)和交联剂N,N'-亚甲基双丙烯酰胺(简称Bis)在催化剂过硫酸铵(APS),N,N,N',N’-四甲基乙二胺(TEMED)作用下,聚合交联形成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持物进行电泳。 2.1电泳缓冲液(1000ml配方) 2.2考马斯亮蓝染色液(1000ml配方) ...
SDS-PAGE、Native及2D电泳试剂配方第一章 SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳 1. 储存液 ① 2 M Tris-HCl(pH 8.8), 100ml 24.2g Tris + 50ml 蒸馏水+浓盐酸至 pH 8.8 (4ml),待室温+蒸馏水至 100ml。 ② 1 M Tris-HCl(pH 6.8), 100ml 12.1g Tris + 50ml 蒸馏水+浓盐酸至 pH 6.8 (8ml),待室温+...
染色液请倒入专用的回收容器内。以自来水小心地淋洗凝胶冲去剩余染料,然后倒入适量的脱色液,微波加热至刚沸腾后于染色摇床上摇动约10 min,倒掉脱色液,此时凝胶的蛋白条带即可看清。重复以上脱色步骤一次,即可看清电泳条带。扫描凝胶蛋白条带需要完全脱掉背景颜色,这...
本发明公开了一种SDS-PAGE电泳凝胶脱 色液的配方及快速脱色的方法,配方为:250ml 乙醇,75ml冰乙酸,纯水定容到1000ml。方法 为:取适量上述脱色液,将胶浸没后,在微波炉 内低火模式下加热1min,再静置15min后,更换 脱色液,重复以上步骤两次就可以完成脱色,整 ...
配制方法：原液使用。应使用电泳级TEMED 。4. 30%丙烯酰胺凝胶贮液（Arc-Bis 贮液） : 含有29的丙烯酰胺和1的甲叉基聚丙 烯酰胺。 丙烯酰胺单体（Arc ）在交联剂作用下形成聚丙烯酰胺。N ，N ’-甲叉双丙烯酰胺（Bis ），交联剂。丙烯酰胺与为蛋白质电泳提供载体，其凝固的好坏直接关系到电泳成功与否，与促...