（参照《分子克隆》二版P884）0.01 MNaOAc (pH5.2) 参照此配方配制。5×Tris-Glycine Buffer（SDS-PAGE电泳缓冲液）组分浓度：0.125 M Tris, 1.25 M Glycine, 0.5%(W/V) SDS 1．称量下列试剂置于烧杯中。2．加入约900 ml去离子水搅拌溶解。3．定容至1L，室温保存。（参照《分子克隆》二版P884）Tra...
2、按照上面配方制SDS-PAGE凝胶,安装好电泳仪,在槽中加入电极缓冲液。 3、按一定顺序在加样孔中加入样品。 4、打开电源将电压调到80v,待样品跑过压缩胶后将电压调到120v至样品电泳到胶底部为止。 5、将凝胶小心取下放入容器中,加入染色液,用摇床摇2-3h 6、待条带清晰后倒出染色液,加入脱色液过夜 7、将脱色...
1Tricine — SDS — PAGE蛋白质电泳溶液准备 1)正极缓冲液(10×):14gTris溶于400mL重蒸水,用1。0MHCl调至pH8。 9 ,定容至500mL。 2)负极缓冲液(10×):将60。55gTris ,89.58gTricine及5gSDS溶于400ml重蒸水中,加水至终体积为500mL。 3)凝胶缓冲液(3×):将181。5gTris ,1.5gSDS溶于400mL重蒸水...
电泳缓冲液也是必不可少的。一般使用Tris甘氨酸缓冲液,其配方为:称取3g Tris碱、144g甘氨酸和1g SDS,加入适量的去离子水,定容至1L。 在配制这些试剂时,有几个关键的注意事项。一是要使用高质量的化学试剂,以确保实验结果的准确性和可靠性。二是所有的操作都要在干净、无污染的环境中进行,避免杂质的引入。三是...
SDS-PAGE电泳溶液的配置 1、5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 试剂 浓度 称重 备注 Tris 0.125 M 15.1g 加入800 ml的双蒸水溶解, 定容至1 L,室温保存 甘氨酸(Glycine) 1.25 M 94g SDS 0.5%(W/V) 5g 2、染色液 试剂 浓度 称重 备注 乙醇 25%(V/V) 250 mL 双蒸水溶解,定容至1 L,滤纸过滤后,室温保存 ...
SDS-PAGE电泳所用溶液: 30 %聚丙烯酰胺溶液 (100 mL) 丙烯酰胺 (Arc) 29 g N,N’-亚甲双丙烯酰胺 (Bis) 1 g 用双蒸水定容至100mL,过滤备用,4?存放 丙稀酰胺29.2g,N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g,加入去离子水定容至100mL,pH值不能超过7.0,过滤于棕色玻璃瓶中4?贮存。 5×Tris-甘氨酸缓冲液 (1 L) ...
8. 上层胶中电泳出现“漏样”：• 原因：玻璃板与胶局部分离，上样缓冲液问题。• 解决方案：小心取下玻璃板，避免分离，上样时避免枪头插得太深。9. 泳道中心凹陷：• 原因：梳子插入后胶暴露于空气中时间过长。• 解决方案：尽量在 25 分钟内插入梳子，避免长时间暴露。结语 通过详细了解SDS-PAGE凝胶...
-配方为: 3g Tris base (pH 8.8) 14.4g glycine 将固体溶解于1L蒸馏水中,并调整pH至8.8 三、电泳缓冲液配方: 1. 离子化追踪剂(Tris-Glycine SDS running buffer) -用于在电泳过程中提供离子追踪剂。 -配方为: 30g Tris base 144g glycine 10gSDS 将固体溶解于1L蒸馏水中。 2. 加速剂(stacking gel buffer...
⑤ 5×样品工作液,10ml 3.1ml 1M Tris-HCl(pH 6.8)(312.5mM)+5ml 50%甘油+0.5ml 1%溴酚蓝(0.05%)+1.4ml 蒸馏水 ⑥ 1×电泳缓冲液(25mM Tris, 192mM glycine, pH8.3) Tris 3.0g;甘氨酸 14.4g;加 MilliQ 水至 1L;室温保存。 2.自制胶 参照 SDS-PAGE 配比 第三章 双向电泳 1.工作液 ① 水化...