• 解决方案：确保梳子与玻璃板匹配，必要时更换。8. 上层胶中电泳出现“漏样”：• 原因：玻璃板与胶局部分离，上样缓冲液问题。• 解决方案：小心取下玻璃板，避免分离，上样时避免枪头插得太深。9. 泳道中心凹陷：• 原因：梳子插入后胶暴露于空气中时间过长。• 解决方案：尽量在 25 分钟内插入...
SDS-PAGE电泳试剂 1)30%贮备胶溶液:丙烯酰胺(Acr)29.0g,亚甲基双丙烯酰(Bis)1.0g,混匀后加ddH 2O,37OC溶解,定容至100 mL,棕色瓶存于4OC; 2)1.5M Tris-HCl(pH:Tris 18.17g加ddH 2O溶解,浓盐酸调pH至,定容至100mL;3)1M Tris-HCl(pH:Tris 12.11g加 ddH 2O溶解,浓盐酸调pH至,定容至100 mL;4)...
（参照《分子克隆》二版P884）0.01 MNaOAc (pH5.2) 参照此配方配制。5×Tris-Glycine Buffer（SDS-PAGE电泳缓冲液）组分浓度：0.125 M Tris, 1.25 M Glycine, 0.5%(W/V) SDS 1．称量下列试剂置于烧杯中。2．加入约900 ml去离子水搅拌溶解。3．定容至1L，室温保存。（参照《分子克隆》二版P884）Tra...
电泳缓冲液也是必不可少的。一般使用Tris甘氨酸缓冲液,其配方为:称取3g Tris碱、144g甘氨酸和1g SDS,加入适量的去离子水,定容至1L。 在配制这些试剂时,有几个关键的注意事项。一是要使用高质量的化学试剂,以确保实验结果的准确性和可靠性。二是所有的操作都要在干净、无污染的环境中进行,避免杂质的引入。三是...
SDS连续电泳凝胶配方 注: 1.缓冲液贮液可用磷酸缓冲液,咪唑缓冲液或其他缓冲液 。 2.过硫酸铵应在即将灌胶前加。过硫酸铵和TEMED的量应根据室温或聚合情况而定。 3.欲配制不同终浓度,不同厚度或不同大小的凝胶,可根据表中的体积按比例变化。 各种缓冲液贮液的的配方如下: ...
SDSPAGE试剂配方SDS-PAGE电泳所用溶液: 30%聚丙烯酰胺溶液 (100 mL) 丙烯酰胺(Arc)29 g N,N’-亚甲双丙烯酰胺(Bis)1 g 用双蒸水定容至100mL,过滤备用,4℃存放 丙稀酰胺29.2g,N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g,加入去离子水定容至100mL,pH值不能超过7.0,过滤于棕色玻璃瓶中4℃贮存。 5×Tris-甘氨酸缓冲液 (...
-配方为: 3g Tris base (pH 8.8) 14.4g glycine 将固体溶解于1L蒸馏水中,并调整pH至8.8 三、电泳缓冲液配方: 1. 离子化追踪剂(Tris-Glycine SDS running buffer) -用于在电泳过程中提供离子追踪剂。 -配方为: 30g Tris base 144g glycine 10gSDS 将固体溶解于1L蒸馏水中。 2. 加速剂(stacking gel buffer...
12%电泳胶的配制(10 mL) Table 12% Gel components Reagents Seperating gel Condensing gel 二块 30% Acr-Bis solution 4 mL 0.67 mL 4×seperating gel buffer 2.5 mL pH8.9 1 mL pH8.9 H2O 3.5 mL 2.3 mL 100 g/L AP 50 μL 30 μL
电泳装置 电泳仪与电源 考马斯亮蓝染色液(或其他染色液) 实验步骤 一、制备SDS-PAGE凝胶 准备分离胶和浓缩胶 按照不同的蛋白质大小,选择合适的分离胶浓度(常见为10-15%)。具体配方如下: 分离胶(Resolving Gel)配方: 水 30%丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺(Acrylamide-Bis solution) ...