• 在干燥、干净的烧杯中按照配方表中的比例混合水、30%丙烯酰胺、0.5 M Tris-HCl (pH 6.8)、10% SDS、10% APS 和 TEMED。TEMED必须是最 后加入的成分。• 搅拌均匀后,立即倒入组装好的玻璃板中,确保均匀分布。• 用水或异丙醇覆盖凝胶表面,以保持均匀的表面,室温下凝固约 20-30 分钟。二...
SDS-PAGE试剂配方SDS-PAGE电泳所用溶液: 30%聚丙烯酰胺溶液 (100 mL) 丙烯酰胺(Arc)29 g N,N’-亚甲双丙烯酰胺(Bis)1 g 用双蒸水定容至100mL,过滤备用,4℃存放 丙稀酰胺29.2g,N-N-甲叉双丙稀酰胺0.8g,加入去离子水定容至100mL,pH值不能超过7.0,过滤于棕色玻璃瓶中4℃贮存。 5×Tris-甘氨酸缓冲液 ...
-用于凝胶电泳盒中电解质的运行。 -配方为: 3g Tris base (pH 8.8) 14.4g glycine 将固体溶解于1L蒸馏水中,并调整pH至8.8 三、电泳缓冲液配方: 1. 离子化追踪剂(Tris-Glycine SDS running buffer) -用于在电泳过程中提供离子追踪剂。 -配方为: 30g Tris base 144g glycine 10gSDS 将固体溶解于1L蒸馏水中...
0.01 MNaOAc (pH5.2) 参照此配方配制。5×Tris-Glycine Buffer(SDS-PAGE电泳缓冲液)组分浓度:0.125 M Tris, 1.25 M Glycine, 0.5%(W/V) SDS 1.称量下列试剂置于烧杯中。2.加入约900 ml去离子水搅拌溶解。3.定容至1L,室温保存。(参照《分子克隆》二版P884)Transfer Buffer:[自配]Transfer B...
SDS凝胶电泳常用试剂配制方法如下: 一、3×SDS-PAGE loading buffer的配制 3×SDS-PAGE loading buffer 10ml 1M Tris-Hcl (PH 6.8) 1.5ml SDS 0.6g BPB(溴酚蓝) 30mg 甘油(丙三醇) 3ml 去离子水 5.5ml 1、将除BPB以外的药品溶解。SDS常温下很难溶解,可以在37℃水浴溶解。溶解后,再加入BPB,进行溶解; ...
SDS-PAGE配方. SDS-PAGE 1)根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶): SDS-PAGE分离胶浓度最佳分离范围 胶6%50-150kD 8%胶30-90kD 10%胶20-80kD 胶12%12-60kD 15%胶10-40kD 成分 配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升) 胶6% 5 10...
western blot SDS-PAGE配方室温静置40min待分离胶聚合完全后倒掉胶上面的水层并用滤纸将多余水分吸干然后将刚配制好的浓缩胶加在分离胶上面在浓缩胶上方马上插上干净的梳子两边平直小心避免气泡混入 (1)SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶配制方法见下表(表1): 表1 SDS一PAGE电泳胶的配制 Tab.1 Preparation of SDS一PAGE ...
这种电泳方法称为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称SDS—PAGE)。由于SDS-PAGE 可设法将电泳时蛋白质电荷差异这一因素除去或减小到可以略而不计的程度,因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度,如果被鉴定的蛋白质样品很纯,只含有一种具三级结构的蛋白质或含有相同分子量亚基的具四级结构的蛋白质,那么SDS—PAGE 后,就只...
1、SDS-PAGE:聚丙烯酰胺凝胶电泳 2、Acr:丙烯酰胺;配胶时用30%Acr(质量比Acr:Bis=29:1) 3、Bis:甲叉双丙烯酰胺 4、DDW:超轻水 5、SDS:十二烷基硫酸/磺酸钠,阴离子去污剂(配胶时用10%) 6、APS:过硫酸铵NH4S2O4配胶时用10% 7、TEMED:四甲基乙二胺,促凝剂 8、Tris-Hcl:3羟基氨基甲烷盐酸缓冲液...