• 解决方案：确保梳子与玻璃板匹配，必要时更换。8. 上层胶中电泳出现“漏样”：• 原因：玻璃板与胶局部分离，上样缓冲液问题。• 解决方案：小心取下玻璃板，避免分离，上样时避免枪头插得太深。9. 泳道中心凹陷：• 原因：梳子插入后胶暴露于空气中时间过长。• 解决方案：尽量在 25 分钟内插入...
在电泳槽中加入适量的跑胶缓冲液(Running buffer),确保完全覆盖凝胶表面。 用微量移液器将样品缓慢加入到凝胶的样品孔中,避免漏入其他孔。 运行电泳 设置电泳条件:在浓缩胶阶段(约80 V)跑至样品进入分离胶,然后提高电压至120-150 V进行分离胶电泳,直到染料前沿接近凝胶底部。 电泳时间通常为1-2小时,取决于凝胶大...
-配方为: 3g Tris base (pH 8.8) 14.4g glycine 将固体溶解于1L蒸馏水中,并调整pH至8.8 三、电泳缓冲液配方: 1. 离子化追踪剂(Tris-Glycine SDS running buffer) -用于在电泳过程中提供离子追踪剂。 -配方为: 30g Tris base 144g glycine 10gSDS 将固体溶解于1L蒸馏水中。 2. 加速剂(stacking gel buffer...
SDS-PAGE电泳试剂 1)30%贮备胶溶液:丙烯酰胺(Acr)29.0g,亚甲基双丙烯酰(Bis)1.0g,混匀后加ddH 2O,37OC溶解,定容至100 mL,棕色瓶存于4OC; 2)1.5M Tris-HCl(pH:Tris 18.17g加ddH 2O溶解,浓盐酸调pH至,定容至100mL;3)1M Tris-HCl(pH:Tris 12.11g加 ddH 2O溶解,浓盐酸调pH至,定容至100 mL;4)...
0.01 MNaOAc (pH5.2) 参照此配方配制。5×Tris-Glycine Buffer（SDS-PAGE电泳缓冲液）组分浓度：0.125 M Tris, 1.25 M Glycine, 0.5%(W/V) SDS 1．称量下列试剂置于烧杯中。2．加入约900 ml去离子水搅拌溶解。3．定容至1L，室温保存。（参照《分子克隆》二版P884）Transfer Buffer:[自配]Transfer ...
12%电泳胶的配制(10 mL) Table 12% Gel components Reagents Seperating gel Condensing gel 二块 30% Acr-Bis solution 4 mL 0.67 mL 4×seperating gel buffer 2.5 mL pH8.9 1 mL pH8.9 H2O 3.5 mL 2.3 mL 100 g/L AP 50 μL 30 μL
3.浓缩胶的配制,以4%浓缩胶为例,配方如下: 将上述试剂充分混合后倒入两玻璃板之间的夹缝中,然后将1mm宽的梳子插入浓缩胶中,请确保梳子与浓缩胶之间没有任何气泡。当浓缩胶完全凝固后,小心地将梳子取出。 4. 电泳槽的组装 将制备好的分离胶及浓缩胶放于电泳槽内(注意小玻璃板朝向内部,大玻璃板朝向外部),然后...
电泳缓冲液也是必不可少的。一般使用Tris甘氨酸缓冲液,其配方为:称取3g Tris碱、144g甘氨酸和1g SDS,加入适量的去离子水,定容至1L。 在配制这些试剂时,有几个关键的注意事项。一是要使用高质量的化学试剂,以确保实验结果的准确性和可靠性。二是所有的操作都要在干净、无污染的环境中进行,避免杂质的引入。三是...