附录:SDS-PAGE法检测分子量试剂配方 1.10% SDS:10g SDS,加纯化水定容至100mL。2.30%丙烯酰胺:丙烯酰胺29g,N,N’-亚甲基双丙烯酰胺1g,加纯化水定容至100mL。3.1M Tris-HCl(pH=6.8):将24.22g Tris用纯化水溶解,加浓盐酸调节pH=6.8,纯化水定容200mL。4.1.5M Tris-HCl(pH=8.8):90....
SDS-PAGE判定蛋白质的分子量:定义:R=de/do R为迁移率,de为蛋白质电泳迁移距离,do为溴酚蓝电泳迁移距离 则lgM=a-bR M为蛋白质分子量,a、b为常熟,a、b可由标准蛋白质(已知分子量的蛋白质)的迁移率算出。若蛋白质为单肽链蛋白质,则M为其分子量;若蛋白质为多肽链蛋白质,则其分子量...
•SDS-PAGE技术是指SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,是一种常用的分离和测定蛋白质相对分子量的方法。SDS-PAGE技术原理 •SDS-PAGE技术利用了SDS(十二烷基硫酸钠)和聚丙烯酰胺凝胶的结合,将蛋白质变性并带负电荷,通过电泳分离大小不同的蛋白质,并利用染色和洗脱技术进行蛋白质相对分子量的测定。SDS-PAGE技术的应用...
SDS-PAGE即十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是一种常用的分离和检测蛋白质的技术。02 它利用了SDS(十二烷基硫酸钠)与蛋白质结合的性质,使蛋 白质带负电荷,从而在电场中向正极移动。聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质,能够根据蛋白质分子量的不同 03 对其进行分离。蛋白质的分子量测定 通过比较标准蛋白的迁移率和...
SDS-PAGE SDS-PAGE即十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳,是一种间断的电泳系统,通常用于分离分子量在5—250kDa之间的蛋白质。十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate ,SDS)和聚丙烯酰胺凝胶(polyacrylamide gel ,PAG)组合使用可以消除结构和电荷的影响,从而仅根据分子量的差异来分离蛋白质。SDS-PAGE测定蛋白质分子...
将待测蛋白质的迁移率带入方程,即可计算得相对其分子量 2.方法/步骤 1 标准蛋白样品的制备:根据待测样品的理论分子量或根据其他参数选用适宜大小的蛋白质分子量标准。2 待测蛋白质样品的制备:取蛋白质样品加入等体积2×SDS-PAGE上样缓冲液,混匀,在沸水浴中加热3min。3 电泳分离与染色:当电泳前沿(溴酚蓝...
实验SDS-PAGE测定蛋白质的相对分子量 一、目的 了解SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理,并学会用这种方法测定蛋白质的相对分子量。 二、原理 聚丙烯酰胺凝胶电泳之所以能将不同的大分子化合物分开,是由于这些大分子化合物所带电荷的差异和分子大小不同之故,如果将电荷差异这一因素除去或减小到可以忽略不计的程度,这些化合...
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)测定蛋白质分子量 一.实验目的 1.学习SDS-PAGE测定蛋白质分子量的原理。 2.掌握垂直板电泳的操作方法。 3.运用SDS-PAGE测定蛋白质分子量及染色鉴定。 二.实验原理 带电质点在电场中向带有异相电荷的电极移动,这种现象称为电泳。 聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)单体和少量交联...
以不同的标准分子量蛋白MARK,与未知蛋白样品一同进行SDS-PAGE电泳。染色后分别计算未知蛋白、标准分子量蛋白MARK的迁移率,然后根据标准分子量蛋白MARK迁移率与其分子量的对数值作图,可得一标准曲线并拟合方程。将未知蛋白迁移率代入拟合方程,求出未知蛋白的分子量。 根据标准分子MRK中已知分子量蛋白质的迁移率与其分子量...