1．配液：根据用量，按照《附录：SDS-PAGE法检测分子量试剂配方》进行配制。2．制胶 由于本实验目的蛋白约66±7kD，故选用10%分离胶。垂直电泳槽的玻璃板清洗干净后，将凹型玻璃与平玻璃重叠，将两块玻璃板放入电泳槽支架内（短玻璃朝里），并将电泳槽支架在桌面水平轻轻磕几下，使玻璃板底部对齐，然后插入斜插...
将待测蛋白质的迁移率带入方程，即可计算得相对其分子量 2.方法/步骤 1 标准蛋白样品的制备：根据待测样品的理论分子量或根据其他参数选用适宜大小的蛋白质分子量标准。2 待测蛋白质样品的制备：取蛋白质样品加入等体积2×SDS-PAGE上样缓冲液，混匀，在沸水浴中加热3min。3 电泳分离与染色：当电泳前沿（溴酚蓝...
SDS-PAGE技术定义 •SDS-PAGE技术是指SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，是一种常用的分离和测定蛋白质相对分子量的方法。SDS-PAGE技术原理 •SDS-PAGE技术利用了SDS（十二烷基硫酸钠）和聚丙烯酰胺凝胶的结合，将蛋白质变性并带负电荷，通过电泳分离大小不同的蛋白质，并利用染色和洗脱技术进行蛋白质相对分子量的测定。SD...
1、SDS - PAGE测定蛋白质的相对分子量1一、实验目的 了解SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理,并学会用这种方法测定蛋白质的相对分子量。2二、实验原理 聚丙烯酰胺凝胶电泳之所以能将不同的大分子化合物分开,是由于这些大分子化合物所带电荷的差异和分子大小不同之故,如果将电荷差异这一因素除去或减小到可以忽略不计的程度...
•学习PAGE分离蛋白质的原理•学习SDS-PAGE测定蛋白质分子量 的原理。•掌握垂直板电泳的操作方法。•运用SDS-PAGE测定蛋白质分子量 及染色鉴定。一.PAGE分离蛋白质的原理 •PAGE根据其有无浓缩效应，分为连续系统 和不连续系统两大类，连续系统电泳体系中缓冲液pH值及凝胶浓度相同，带电颗粒在电场作用下，...
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法测定蛋白质的分子量具有简便、快速、重复性好的优点,是目前一般实验室常用的测定蛋白质分子量的方法。 三、试剂及主要器材 1.主要试剂 1)标准蛋白混合液 内含:磷酸化酶(Mw 94,000),牛血清蛋白(Mw 67,000),肌动蛋白(Mw 43,000),磷酸酐酶(Mw 30,000)和溶菌酶(Mw 14,...
五、结果与计算 观察蛋白染色的凝胶照片,与标准蛋白分子量相比较,大约算出未知样品的分子量。 思考题 1、SDS-PAGE测定蛋白质分子量的原理是什么? 2、本实验是否需在低温下进行? 3、样品溶解液中各种试剂的作用是什么? 4、影响实验误差可能...
SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量 CH2=CHC=ONH2 丙烯酰胺 CH2-CH(CH2¯CH)nCH2-CH(CH2-CH)mCH2-CH C=O C=OC=O NH2 NH NH2 CH2 NH C=O CH2-CH(CH2-CH)nCH2-CH(CH2-CH)mCH2-CH C=O C=O NH2 NH2 聚丙烯酰胺 CH2=CHC=ONHCH2NHC=O CH2=CHN,N’-甲叉双丙烯酰胺 PAG机械强度好，有弹性，...
以及所带电荷量。.在聚丙烯酰胺凝胶系统中,加入适量SDS(阴离子表面活性剂),使蛋白质的氢键和疏水键打开,并结合到蛋白质分子上(一定条件下,大多数蛋白质与之结合比为1.4gSDS/1gprotein),使各种蛋白质-SDS复合物都带上相同密度的负电荷,其数量远远超过了蛋白质分子原有的电荷量,从而掩盖了不同种类蛋白质之间原有...