附录:SDS-PAGE法检测分子量试剂配方 1.10% SDS:10g SDS,加纯化水定容至100mL。2.30%丙烯酰胺:丙烯酰胺29g,N,N’-亚甲基双丙烯酰胺1g,加纯化水定容至100mL。3.1M Tris-HCl(pH=6.8):将24.22g Tris用纯化水溶解,加浓盐酸调节pH=6.8,纯化水定容200mL。4.1.5M Tris-HCl(pH=8.8):90....
SDS-PAGE即十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是一种常用的分离和检测蛋白质的技术。02 它利用了SDS(十二烷基硫酸钠)与蛋白质结合的性质,使蛋 白质带负电荷,从而在电场中向正极移动。聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质,能够根据蛋白质分子量的不同 03 对其进行分离。蛋白质的分子量测定 通过比较标准蛋白的迁移率和...
•SDS-PAGE技术是指SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,是一种常用的分离和测定蛋白质相对分子量的方法。SDS-PAGE技术原理 •SDS-PAGE技术利用了SDS(十二烷基硫酸钠)和聚丙烯酰胺凝胶的结合,将蛋白质变性并带负电荷,通过电泳分离大小不同的蛋白质,并利用染色和洗脱技术进行蛋白质相对分子量的测定。SDS-PAGE技术的应用...
SDS-PAGE SDS-PAGE即十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳,是一种间断的电泳系统,通常用于分离分子量在5—250kDa之间的蛋白质。十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate ,SDS)和聚丙烯酰胺凝胶(polyacrylamide gel ,PAG)组合使用可以消除结构和电荷的影响,从而仅根据分子量的差异来分离蛋白质。SDS-PAGE测定蛋白质分子...
将待测蛋白质的迁移率带入方程,即可计算得相对其分子量 2.方法/步骤 1 标准蛋白样品的制备:根据待测样品的理论分子量或根据其他参数选用适宜大小的蛋白质分子量标准。2 待测蛋白质样品的制备:取蛋白质样品加入等体积2×SDS-PAGE上样缓冲液,混匀,在沸水浴中加热3min。3 电泳分离与染色:当电泳前沿(溴酚蓝...
相对迁移率和分子量计算LogM=a-bRf 相对迁移率(Rf)=蛋白移动的距离/染料移动的前沿距离 以Rf为横坐标,已知分子量标准蛋白的对数为纵坐标,在半对数坐标纸上绘图,由标准曲线中查出样品分子量。SDS-PAGE 实验流程(SDS-PAGE) 电泳技术流程:制备载体(制胶)→加样→...
实验SDS-PAGE测定蛋白质的相对分子量 一、目的 了解SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理,并学会用这种方法测定蛋白质的相对分子量。 二、原理 聚丙烯酰胺凝胶电泳之所以能将不同的大分子化合物分开,是由于这些大分子化合物所带电荷的差异和分子大小不同之故,如果将电荷差异这一因素除去或减小到可以忽略不计的程度,这些化合...
分子量(还原型SDS-PAGE)测定标准操作规程.pdf,细胞因子分子量(还原型 SDS)测定标准操作规程 依据:《中华人民共和国药典》2005 年版第三部。 范围:适用于细胞因子蛋白质分子量测定。 目的:测定待检品分子量是否符合《中华人民共和国药典》2005 年版要求 原理:SDS-聚丙
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)测定蛋白质分子量 一.实验目的 1.学习SDS-PAGE测定蛋白质分子量的原理。 2.掌握垂直板电泳的操作方法。 3.运用SDS-PAGE测定蛋白质分子量及染色鉴定。 二.实验原理 带电质点在电场中向带有异相电荷的电极移动,这种现象称为电泳。 聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(简称Acr)单体和少量交联...