根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶):不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围: SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围 6%胶 50-150kD 8%胶 30-90kD 10%胶 20-80kD 12%胶 12-60kD 15%胶 10-40kD 注:如果配制非变性胶,参考分离胶配方,分离胶中不...
1)根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶): SDS-PAGE分离胶浓度最佳分离范围 胶6%50-150kD 8%胶30-90kD 10%胶20-80kD 胶12%12-60kD 15%胶10-40kD 成分 配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升) 胶6% 5 10 15 20 30 50 蒸馏水 2....
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶):不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围: SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围 6%胶 50-150kD 8%胶 30-90kD 10%胶 20-80kD 12%胶 12-60kD 15%胶 10-40kD 注:如果配制非变性胶,参考分离胶配方,分离胶中不...
掌握SDS-PAGE凝胶电泳测定蛋白质亚基分子量的基本原理和操作方法 二原理 SDS是一种阴离子去污剂,作为变性剂和助溶性试剂,能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白质分子的二级、三级结构;而强还原剂,如二硫苏糖醇、β-巯基乙醇能使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂。 因此,在样品和凝胶中加入SDS和还原剂...
重链在55Kda左右，轻链在25Kda左右。
由于SDS-PAGE可设法将电泳时蛋白质电荷差异这一因素除去或减小到可以略而不计的程度,因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度,如果被鉴定的蛋白质样品很纯,只含有一种具三级结构的蛋白质或含有相同分子量亚基的具四级结构的蛋白质,那么SDS—PAGE后,就只出现一条蛋白质区带。 TEMED:通过催化过硫酸铵形成自由基而加速...
SDS,PAGE电泳原理,聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺,简称Acr,和交联剂N,N亚甲基双丙烯酰胺,简称Bis,在催化剂作用下,聚合交联而成的具有网状立体结构的凝胶,并以此为支持物进行电泳,聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据不同蛋白质分子所带电荷的差异
表1 蛋白质分子量范围与SDS-聚丙烯酰胺凝胶浓度的关系 与常规PAGE相似,电泳缓冲系统和凝胶浓度是影响 SDS-PAGE分离效果的主要因素。 在SDS-PAGE中,由于蛋白质与SDS结合后都带负电,因此是阳极电泳。 与常规聚丙烯酰胺凝胶电泳相似,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳也可分为圆盘电泳、垂直平板电泳和水平平板电泳。其中平板电泳较常...
凝胶电泳法(SDS-PAGE)测定乳与乳制品中 β-乳球蛋白的含量
由于SDS-PAGE可设法将电泳时蛋白质电荷差异这一因素除去或减小到可以略而不计的程度,因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度,如果被鉴定的蛋白质样品很纯,只含有一种具三级结构的蛋白质或含有相同分子量亚基的具四级结构的蛋白质,那么SDS—PAGE后,就只出现一条蛋白质区带。袅TEMED:通过催化过硫酸铵形成自由基而...