根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶):不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围: SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围 6%胶 50-150kD 8%胶 30-90kD 10%胶 20-80kD 12%胶 12-60kD 15%胶 10-40kD 注:如果配制非变性胶,参考分离胶配方,分离胶中不...
1)根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶): SDS-PAGE分离胶浓度最佳分离范围 胶6%50-150kD 8%胶30-90kD 10%胶20-80kD 胶12%12-60kD 15%胶10-40kD 成分 配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升) 胶6% 5 10 15 20 30 50 蒸馏水 2....
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶):不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围: SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围 6%胶 50-150kD 8%胶 30-90kD 10%胶 20-80kD 12%胶 12-60kD 15%胶 10-40kD 注:如果配制非变性胶,参考分离胶配方,分离胶中不...
掌握SDS-PAGE凝胶电泳测定蛋白质亚基分子量的基本原理和操作方法 二原理 SDS是一种阴离子去污剂,作为变性剂和助溶性试剂,能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白质分子的二级、三级结构;而强还原剂,如二硫苏糖醇、β-巯基乙醇能使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂。 因此,在样品和凝胶中加入SDS和还原剂...
由于SDS-PAGE可设法将电泳时蛋白质电荷差异这一因素除去或减小到可以略而不计的程度,因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度,如果被鉴定的蛋白质样品很纯,只含有一种具三级结构的蛋白质或含有相同分子量亚基的具四级结构的蛋白质,那么SDS—PAGE后,就只出现一条蛋白质区带。 TEMED:通过催化过硫酸铵形成自由基而加速...
1)根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶): SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围 6%胶 50-150kD 8%胶 30-90kD 10%胶 20-80kD 12%胶 12-60kD 15%胶 10-40kD 成分 配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升) ...
重链在55Kda左右，轻链在25Kda左右。
凝胶电泳法(SDS-PAGE)测定乳与乳制品中 β-乳球蛋白的含量
SDS-PAGE凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS, SDS会与变性的多肽结合,并使蛋白带负电荷,由于多肽结合SDS的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关,因此SDS多肽复合物在电泳中的迁移率只与多肽的分子量大小有关。 虽然WB已经成为实验室的基础研究工具,但做出完美的条带也不是一个简单的事情,WB步骤复...
由于SDS-PAGE 可设法将电泳时蛋白质电荷差异这一因素除去或减小到可以略而不计的程度,因此常用来鉴定蛋白质分离样品的纯化程度,如果被鉴定的蛋白质样品很纯,只含有一种具三级结构的蛋白质或含有相同分子量亚基的具四级结构的蛋白质,那么SDSPAGE 后,就只出现一条蛋白质区带。TEMED:通过催化过硫酸铵形成自由基而加速...