1.配液:根据用量,按照《附录:SDS-PAGE法检测分子量试剂配方》进行配制。2.制胶 由于本实验目的蛋白约66±7kD,故选用10%分离胶。垂直电泳槽的玻璃板清洗干净后,将凹型玻璃与平玻璃重叠,将两块玻璃板放入电泳槽支架内(短玻璃朝里),并将电泳槽支架在桌面水平轻轻磕几下,使玻璃板底部对齐,然后插入斜插...
SDS-PAGE电泳法测定蛋白质分子量 实验目的 学习并掌握SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法和测定蛋白质分子量的技术 实验原理 1.蛋白质混合样品中各蛋白质组分的分子大小和形状以及所带电荷多少等因素所造成的电泳迁移率有差别。在聚丙烯酰胺凝胶系统中,加入一定量十二烷基硫酸钠(SDS),形成蛋白质-SDS复合物,这种复合物...
SDS-PAGE即十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是一种常用的分离和检测蛋白质的技术。02 它利用了SDS(十二烷基硫酸钠)与蛋白质结合的性质,使蛋 白质带负电荷,从而在电场中向正极移动。聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质,能够根据蛋白质分子量的不同 03 对其进行分离。蛋白质的分子量测定 通过比较标准蛋白的迁移率和...
•SDS-PAGE技术是指SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,是一种常用的分离和测定蛋白质相对分子量的方法。SDS-PAGE技术原理 •SDS-PAGE技术利用了SDS(十二烷基硫酸钠)和聚丙烯酰胺凝胶的结合,将蛋白质变性并带负电荷,通过电泳分离大小不同的蛋白质,并利用染色和洗脱技术进行蛋白质相对分子量的测定。SDS-PAGE技术的应用...
SDS-PAGE即十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳,是一种间断的电泳系统,通常用于分离分子量在5—250kDa之间的蛋白质。十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate ,SDS)和聚丙烯酰胺凝胶(polyacrylamide gel ,PAG)组合使用可以消除结构和电荷的影响,从而仅根据分子量的差异来分离蛋白质。SDS-PAGE测定蛋白质分子量 蛋白质...
是否所有的蛋白质都能用SDS-PAGE测定其分子量?为什么?两种方法原理不同,有差异是正常的。如果差距较大,要仔细分析。一般凝胶层析是非变性的,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳是变性的,二硫键也被还原,所以是亚基(肽链)分子量。凝胶层析与分子形状有关,一般marker都是球状蛋白,所以测球状蛋白分子量较准。SDS-聚丙烯酰胺凝胶...
SDS-PAGE是凝胶电泳的一种,其分离原理是基于不同分子量的蛋白质(亚基)在电场中的迁移率不同,因此利用该技术测定未知蛋白质(亚基)的分子量是十分方便的,具体的方法是利用标准分子量MARK,与样品一同电泳,染色后根据标准分子MARK中已知分子量蛋白质的迁移率与其分子量的对数值作图,可得一标准曲线并拟合方程,再结合未...
SDS按一定的比例和蛋白质分子结合成复合物,使蛋白质带负电荷的量远远超过其本身原有的电荷,掩盖了各种蛋白质分子间的天然的电荷差异。SDS最终使蛋白质变成具有高负电荷的线状分子。(2’) SDS-蛋白质复合物在PAGE凝胶中的电泳迁移率不再受到蛋白质原有电荷的影响,而主要取决于蛋白质的分子量大小,因此利用SDS-PAGE...
以不同的标准分子量蛋白MARK,与未知蛋白样品一同进行SDS-PAGE电泳。染色后分别计算未知蛋白、标准分子量蛋白MARK的迁移率,然后根据标准分子量蛋白MARK迁移率与其分子量的对数值作图,可得一标准曲线并拟合方程。将未知蛋白迁移率代入拟合方程,求出未知蛋白的分子量。 根据标准分子MRK中已知分子量蛋白质的迁移率与其分子量...
搜索 题目 用SDS-PAGE测定血红蛋白的相对分子量应该是? A.整个血红蛋白的分子量B.血红蛋白的α亚基的分子量C.血红蛋白的β亚基的分子量D.血红蛋白的α和β亚基各自的分子量 答案 D 解析收藏 反馈 分享