SDS-PAGE常见问题分析 1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响？在SDS－PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9；而电泳缓冲液使用的Tris－甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低；而CL离子却很高，两者之间...
可能原因:样品浓度过高或过低,凝胶浓度不合适,电泳条件不合适。 解决方案:调整样品浓度,选择合适的凝胶浓度,并优化电泳条件,如电压、时间和温度。🌬️ 电泳条带出现拖尾 可能原因:样品中存在高分子量物质或聚集体,凝胶浓度过低,电泳时间过长。 解决方案:进行样品预处理,如离心或过滤,去除高分子量物质或聚集体,提...
凝胶凝结问题 在SDS-PAGE电泳中，凝胶的凝结是一个至关重要的步骤。通常，凝胶的凝固时间应控制在30分钟至1小时以内。若发现凝胶凝结速度过慢或根本无法凝固，这可能与引发聚合反应的试剂——TEMED和APS的状态有关。这两种试剂的用量不足或失效，都会导致凝胶凝固缓慢或失败。值得注意的是，APS（过硫酸铵）由于其不...
SDS-PAGE常见问题与解决方法 一.凝胶问题 1. 胶的凝结不好，例如有花纹特别是浓度高的胶在冬天温度较低的情况下，在分离胶的下部有波浪样的花纹，凝胶不均匀。解决方法：加大TEMED 和过硫酸胺的量，使其凝结速度加快。同时洗干净玻璃板，防止有残留的胶干结在玻璃板上。2. 胶不凝，解决方法：温度较低时加大...
凝胶凝结问题 在SDS-PAGE电泳中，我们常常会遇到凝胶凝结速度过慢或无法凝固的情况。这通常与引发聚合反应的试剂——TEMED和APS的状态有关。如果这两种试剂的用量不足或已失效，那么凝胶的凝固过程就会受到影响。值得注意的是，APS（过硫酸铵）由于其不稳定性，容易在长时间暴露于空气中后分解失效，因此每次使用时都...
SDS-PAGE电泳常见问题及解决方案 问题 原因 解决方案 ①出现“微笑”形带(两边翘起中间凹下) 由于凝胶的中间部分凝固不均匀所致,多出现于较厚的凝胶中 待其充分凝固再作后续实验 ②出现“皱眉”形带(两边向下中间鼓起) 主要出现在蛋白质垂直电泳槽中,一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净 可在两板间加入适量...
SDS PAGE 电泳 常见问题分析 1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响 在 SDS PAGE 不连续电泳中 制胶缓冲液使用的是 Tris HCL 缓冲系统 浓缩胶是 pH6.7 分离胶 pH8.9 而电泳缓冲液使用的 Tris 甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中 其 pH 环境呈弱酸性 因此甘氨酸解离很少 其在电场的作用下 泳动效率低 而 CL 离子却很高 ...
A: SDS-PAGE利用SDS分子与蛋白质结合,使蛋白质带负电。蛋白质-SDS复合物在凝胶中根据分子量大小分离。蛋白质的迁移率与其分子量成正比。🧪 Q: 缓冲液系统对电泳有何影响? A: 制备凝胶时使用Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶pH为6.7,分离胶pH为8.9。在浓缩胶的弱酸性环境下,蛋白质聚集成狭窄区带,进入碱性分离胶时根...
SDS-PAGE 是一种常用的蛋白质分离技术,用于根据蛋白质的分子量进行分离。如果你的结果不是一条直线,可能有以下几个原因: 1.样品加载量过多或过少: 如果你加载的样品量过多,可能会导致带状模糊或重叠;如果加载的样品量过少,可能会导致带状模糊或信号弱。建议优化样品加载量,使其适中。