①微量分光光度计检测RNA浓度。先用稀释用的TE buffer将分光光度计调零,然后取少量RNA溶液用TE稀释后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的OD值。OD260下读值为1表示40 ng RNA/ml,样品RNA浓度(g/ml)计算公式为:OD260×稀释倍数×40 ng/ml。OD260/OD280的比值在1.8~2.0的范围内为佳。②变性琼脂糖...
一. RT-qPCR 基本原理和概念实时荧光定量PCR (Quantitative Real-time PCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。 以cDNA 为模板进行 PCR,在 PCR 扩增过程中,通过收集荧光信号,对 PCR进程进行实时...
迈迪安提供专门的RT-qPCR Buffer (MDX034),含有优化的离子和dNTP浓度,能够大大简化研发优化的时间。 04 gDNA去除 RNA中存在基因组DNA(gDNA)污染可能会引起qPCR反应中出现假阳性,导致结果的不准确,所以逆转录实验中gDNA的去除也是至关重要。通常在RNA提取过程中...
Lyo-Ready 1-Step RT-qPCR Buffer, MDX052 Application: RT-qPCR Specimen Type: RNA Concentration: 2x High Concentration: No Wet: Liquid Glycerol-Free: Yes Lyo-Ready: Yes Air-Dryable: No Dryable: Lyo-Ready Sustainability: Lyophilizable Glycerol-free RT-qPCR reaction buf...
RT-qPCR是通过检测反应体系中的荧光强度来检测PCR扩增产物的,其荧光标记方法分为两种:荧光染料嵌合法和荧光探针法。 1.荧光染料嵌合法 荧光染料嵌合法即应用一种带有荧光的、非特异的DNA结合染料检测PCR过程中积累的扩增产物。常用SYBR Green I染料,该染料在游离状态下几乎不会产生荧光,可以非特异地结合在双链DNA的...
RT-PCR就是逆转录PCR(Reverse transcription PCR)或称为反转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR),是以RNA为材料应用于PCR扩增中的一种实验方法。首先通过逆转录酶将总RNA或信使RNA(mRNA)转录成互补DNA(cDNA)。其次Taq DNA聚合酶以cDNA为模板进行qPCR扩增。RT-PCR已...
【产品名称】Magigen一步法 RT-qPCR 预混液(化学修饰) 【包装规格】1000T 【RT-qPCR价格】5480元【产品内容】 产品组成 体积 2× Reaction Buffer 1a 12.5 ml qPCR Enzyme Mix CMMb 1ml a. 包含dNTPs、Mg2+等; b. 包含 MMLV Reverse Transciptase、RNase Inhibitor 以及 CMM Hotstart Taq DNA Polymerase等...
RT-qPCR 定量逆转录PCR(quantitative reverse transcription PCR, RT-qPCR)是应用于以RNA作为起始材料的PCR实验中的一种实验方法。在该方法中,总RNA或信使RNA(mRNA)首先通过逆转录酶转录成互补DNA(cDNA)。随后,以cDNA为模板进行qPCR反应。 RT-qPCR可通过一步法或两步法来完成。一步法RT-qPCR把逆转录与PCR扩增结合...
①微量分光光度计检测RNA浓度。先用稀释用的TE buffer将分光光度计调零,然后取少量RNA溶液用TE稀释后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的OD值。OD260下读值为1表示40 ng RNA/ml,样品RNA浓度(g/ml)计算公式为:OD260×稀释倍数×40 ng/ml。OD260/OD280的比值在1.8~2.0的范围内为佳。
Direct RT-qPCR Kit提供独立包装的RT-qPCR Buffer和高效Enzyme Mixture(Taq、M-MLV、RI),便于后端试剂盒的开发和体系调整,简单验证即可。 该反应体系使用Foregene研制的逆转录酶及热启动Taq酶,配合独特的反应液,使得该产品具有强大的抗逆性和兼容性,可以直接使用样本裂解液(可搭配Foregene Lysis System)作为模板进行检测...