解析 因为RT-PCR的模版是单链的RNA,一种引物就够了,而常规PCR的引物是双链DNA,需要上下游引物从两端同时扩增.结果一 题目 RT-PCR实验 为什么RT只加反义引物PCR要加正义引物和反义引物 答案 因为RT-PCR的模版是单链的RNA,一种引物就够了,而常规PCR的引物是双链DNA,需要上下游引物从两端同时扩增. 相关推荐...
RT-PCR就是逆转录PCR(Reverse transcription PCR)或称为反转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR),是以RNA为材料应用于PCR扩增中的一种实验方法。首先通过逆转录酶将总RNA或信使RNA(mRNA)转录成互补DNA(cDNA)。其次Taq DNA聚合酶以cDNA为模板进行qPCR扩增。RT-PCR已...
RT-PCR技术在进行反转录反应时，引物的选择至关重要。对于长的或具有发卡结构的RNA，如rRNA、mRNA和tRNA，随机引物是一种适用的选择，特别适用于单一模板的RT-PCR反应。这类引物的广泛适用性使其能兼容各种类型的RNA，包括那些带有PolyA尾巴的RNA，如真核生物的mRNA和tRNA（原核生物的RNA则不在此列）。
RT-PCR:特指反转录PCR (Reverse Transcription-PCR),即以RNA为模板反转录成cDNA,再以cDNA为模板进行PCR扩增。 qPCR:指实时荧光定量PCR(quantitative Real time-PCR ),即PCR过程中每个循环都有数据的实时记录,因此可以对起始模板数量进行精确的分析。 Real time PCR:一般缩写为 qPCR,与qPCR定义相同。 RT-qPCR/ Rea...
RT-PCR引物/探针是RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)技术中不可缺部分,它们各自在PCR过程中扮演着重要的角色。以下是关于RT-PCR引物/探针的详细解释: 一、RT-PCR引物 定义与功能:引物是用来扩增特定DNA或RNA片段的短链核酸序列。在RT-PCR中,引物通常与逆转录酶一起使用,以RNA为模板合成cDNA的第一条链,然后在PCR...
是cDNA，也就是与总mRNA互补配对的系列，因此可以理解成代表的是mRNA
逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR)的原理是：提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增，而获得目的基因或检测基因表达。合成cDNA引物的选择是分子生物学实验中的一项关键步骤，它直接...
DNA(PCR)只能证明有这个基因，不能证明这个基因表达与否，只有RNA(RT-PCR)才能看出基因表达与否。二者排列组合可以出现3种情况：（1）DNA与RNA都阳性，说明有这个基因，并且目前表达。（2）DNA阳性，RNA阴性，说明有这个基因但目前不表达。（3）DNA阴性（不应写成“DNA表达阴性”）而RNA表达阳性，如果做...
RT- PCR,英文名为 Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,即逆转录PCR,是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。这项技术使用的逆转录酶来自逆转录病毒,是一种能按照碱基互补配对原则,以脱氧核糖核苷酸为底物,以寡居dT为引物,把mRNA转换成相应DNA的酶,由于该酶的效果与中心法则(DNA...