解析(1)图1中过程Ⅰ表示逆转录,需逆转录酶的催化,过程Ⅱ是PCR技术,常用的酶是TaqDNA聚合酶,这两种酶都能催化磷酸二酯键的形成。(2)图1中过程Ⅰ和过程Ⅱ的产物都是DNA,所以利用的原料相同,都是4种脱氧核糖核苷酸。复性过程中,引物与模板链结合,因此引物A和B的长度越长、G和C比例越高,则该过程所需的温度就...
逆转录酶(Reverse Transcriptase,简称RT酶)是一种能够将RNA模板转化为互补DNA(cDNA)的酶。在分子生物学研究中,逆转录酶的应用极为广泛,特别是在分子诊断领域发挥着作用。通过逆转录过程,可以将病毒的RNA基因组转换为cDNA,之后便可以利用如qPCR等技术对其进行扩增和检测。这一特性使得对诸如艾滋病、甲型流感以及乙型流感...
RT-PCR是将RNA逆转录(过程Ⅰ)和cDNA的聚合酶链式扩增反应(过程Ⅱ)相结合的技术,具体过程如图1所示,图2为某兴趣小组设计的引物。请分析回答下列问题:mRNA53CDNA引物A:5GATTAs'BCGACT3引物B:535AACTGCAGTT图1图2(1)过程Ⅰ主要涉及的酶是___。进行过程Ⅱ的反应体系中常用的酶是___,二者都能催化___键的形成...
酶促催化使RNA反 转录为cDNA第一链。 一 条寡聚脱氧核苷酸引物先 与 mRNA杂交,然后 由RNA依赖的DNA聚合酶催化合成相应互补的cDNA拷贝,后者能进一步 用于PCR扩增。依据实验的不同目的,针对单链cDNA第一链合成的引物 可根据特殊的靶基因设计特殊的引物与之杂交,或可用随机引物与所有mRNA杂交等。 实验材料 组织细胞 ...
试题来源: 解析 【解析】做RT首先要知道第一步是提取细胞内的总RNA然后将RNA加入反转录酶进行PCR.,反转录还是遵循碱基互补配对原则以mRNA为母链合成子链cDNA,所以只能是单链结构然后下一次循环时候则会以合成的cDNA为模版继续进行PCR剩余的过程** 反馈 收藏 ...
新型冠状病毒的检测方法很多,实时荧光RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)法是目前核酸检测的主要方法,操作流程:采集样本→提取RNA→逆转录成cDNA→PCR扩增→结果分析。如图是RT-PCR两步法的过程图,在PCR扩增时加入能与目的基因(新冠病毒的核壳蛋白N基因)结合的荧光探针。目的基因合成越多,荧光信号越强,回答下列问题。(1...
RT-PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术,具体过程如图所示,有关叙述正确的是( ) A. 过程Ⅰ需要加入脱氧核苷酸、mRNA、RN
RT-PCR 是一种把RNA分子转录为cDNA后,在体外进行DNA扩增的技术。RT-PCR技术结合了反转录和PCR两个步骤,主要用于RNA分子的扩增和检测,如基因转录水平分析、miRNA表达研究等。 RT-qPCR 逆转录实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)是一种结合了逆转录PCR和实时定量PCR的技术,可以对RNA分子进行定量分析。RT-qPCR先通过反...
过程Ⅱ首先将mRNA-cDNA杂合双链解开,再以单链cDNA为模板合成双链DNA,最后利用PCR技术进行大量扩增。 (1)过程Ⅰ以mRNA为模板合成cDNA的过程,表示逆转录,需要加入缓冲液、原料、RNA提取物、逆转录酶和引物A等。 (2)过程Ⅰ以mRNA为模板合成cDNA,形成cDNA-mRNA杂合双链。因此,过程Ⅱ首先要将反应体系的温度升高到95 ...