解析(1)图1中过程Ⅰ表示逆转录,需逆转录酶的催化,过程Ⅱ是PCR技术,常用的酶是TaqDNA聚合酶,这两种酶都能催化磷酸二酯键的形成。(2)图1中过程Ⅰ和过程Ⅱ的产物都是DNA,所以利用的原料相同,都是4种脱氧核糖核苷酸。复性过程中,引物与模板链结合,因此引物A和B的长度越长、G和C比例越高,则该过程所需的温度就...
试题来源: 解析 【解析】做RT首先要知道第一步是提取细胞内的总RNA然后将RNA加入反转录酶进行PCR.,反转录还是遵循碱基互补配对原则以mRNA为母链合成子链cDNA,所以只能是单链结构然后下一次循环时候则会以合成的cDNA为模版继续进行PCR剩余的过程** 反馈 收藏 ...
RT-PCR 是将 RNA 的反转录(RT)和 cDNA 的聚合酶链式扩增(PCR)相结 合的技术。首先经反转录酶的作用从 RNA 合成 cDNA,再以 cDNA 为模板, 扩增合成目的片段。RT-PCR 技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基 因表达水平,细胞中 RNA 病毒的含量和直接克隆 特定基因的 cDNA 序列。 作为模板的 RNA 可以是总...
RT-PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术,具体过程如图所示,有关叙述正确的是( ) A. 过程Ⅰ需要加入脱氧核苷酸、mRNA、RN
解析(1)过程I为将mRNA逆转录成DNA的过程,该过程需要加入缓冲液、原料和引物A外还需要加入模板(即RNA提取物)和逆转录酶。(2)mRNA逆转录形成cDNA后,就要利用cDNA为模板进行PCR过程,首先将反应体系温度升高到95℃,一方面使逆转录酶失活,防止逆转录的继续发生,一方面将mRNA-cDNA杂合双链解开后以cDNA单链为模板进行PCR...
简述RT-PCR原理及核酸类型。答:首先,经逆转录酶的作用从RNA合成cDNA,再以cDNA为模板,扩增合成目的片段。实验中所加入的特殊试剂聚丙酰胺凝胶电泳:P47-48
16.RT-PCR是将 RNA逆转录 (RT)成cDNA (与 mRNA互补的DNA单链) 和聚合酶链式反应(PCR)相结合的技术,具体过程如图所示,下列叙述正确的是(D)5/一3mRNA3'A5I35'cDNA35'B3'- 5'T II3553 A.过程I获得cDNA的过程与DNA复制过程中存在的碱基配对方式相同 B.图中 A、 B两种引物的核苷酸序列不同,但参与...
[解析](1)过程①是逆转录过程,操作时需要加入缓冲液、原料、模板(RNA提取物)、酶(逆转录酶)和引物A等。 (2)过程②将反应体系的温度升高到95 ℃的目的是让逆转录酶变性失活,同时使mRNA-cDNA杂合双链解开。 接下来所用的Taq DNA聚合酶至少应能耐受95 ℃高温。 (3)决定RT-PCR扩增片段的是引物A和引物B上的...
(8分)RT- PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术,具体过程如下图所示:(1)过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、 ▲ 、
用于RNA定量的一步法RT-PCR 用于RNA定量的两步法RT-PCR DNA/cDNA定量 SYBR Green 预混液选择指南 >> TaqMan试剂 最初,使用嵌入式染料进行实时荧光PCR (qPCR) 产物定量。但这些染料存在重大缺点,即会同时检测特异性以及非特异性PCR产物的扩增量。 TaqMan方法的开发 通过引入基于...