定义:RT-PCR是逆转录聚合酶链反应(Reverse Transcription PCR),一种将RNA转录为cDNA后在体外进行DNA扩增的技术。RT-PCR技术结合了反转录和PCR两个步骤。 应用:RT-PCR主要用于RNA分子的扩增和检测 04 RT-qPCR 定义:RT-qPCR是逆转录实时...
解析(1)图1中过程Ⅰ表示逆转录,需逆转录酶的催化,过程Ⅱ是PCR技术,常用的酶是TaqDNA聚合酶,这两种酶都能催化磷酸二酯键的形成。(2)图1中过程Ⅰ和过程Ⅱ的产物都是DNA,所以利用的原料相同,都是4种脱氧核糖核苷酸。复性过程中,引物与模板链结合,因此引物A和B的长度越长、G和C比例越高,则该过程所需的温度就...
试题来源: 解析 【解析】做RT首先要知道第一步是提取细胞内的总RNA然后将RNA加入反转录酶进行PCR.,反转录还是遵循碱基互补配对原则以mRNA为母链合成子链cDNA,所以只能是单链结构然后下一次循环时候则会以合成的cDNA为模版继续进行PCR剩余的过程** 反馈 收藏 ...
实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)指的是在PCR进行的同时,对其过程进行监测的能力(即实时)。因此,数据可在PCR扩增过程中,而非PCR结束之后,进行收集。这为基于PCR的DNA和RNA定量方法带来了革命性的变革。在实时荧光定量PCR (qPCR)中,反应以循环中首次检测到目标扩增的时间点为特征...
过程Ⅱ首先将mRNA-cDNA杂合双链解开,再以单链cDNA为模板合成双链DNA,最后利用PCR技术进行大量扩增。 (1)过程Ⅰ以mRNA为模板合成cDNA的过程,表示逆转录,需要加入缓冲液、原料、RNA提取物、逆转录酶和引物A等。 (2)过程Ⅰ以mRNA为模板合成cDNA,形成cDNA-mRNA杂合双链。因此,过程Ⅱ首先要将反应体系的温度升高到95 ...
【题目】RT-PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术,可利用此技术获取目的基因,具体过程如图所示,以下说法错误的是 ( ) A. 设计扩增目的基因的引物时需考虑表达载体的序列 B. GC含量高的引物在与模板链结合时,需要更高的温度 C. 过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、Taq酶和引物A等 D. 过程...
RT-PCR 是将 RNA 的反转录(RT)和 cDNA 的聚合酶链式扩增(PCR)相结 合的技术。首先经反转录酶的作用从 RNA 合成 cDNA,再以 cDNA 为模板, 扩增合成目的片段。RT-PCR 技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基 因表达水平,细胞中 RNA 病毒的含量和直接克隆 特定基因的 cDNA 序列。 作为模板的 RNA 可以是总...
RT-PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术,具体过程如图所示,有关叙述正确的是( ) A. 过程Ⅰ需要加入脱氧核苷酸、mRNA、RN
Real-time RT-PCR MasterMix ??本品是专为Real-time RT-PCR而研发的快速逆转录试剂混合液。5×SuperQuick RT MasterMix中包含SuperFastRT逆转酶、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP、RT Buffer等从RNA模板逆转录成cDNA第一链所需的全部试剂。该产品的逆转录效率高,可对少量RNA模板进行良好的...
一般合成cDNA使用逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)。逆转录酶PCR (RT-PCR)是扩增靶RNA的聚合酶链反应的一种变体。在PCR之前添加逆转录酶(RT)酶使扩增和检测RNA靶标成为可能。逆转录酶转录模板RNA并形成互补DNA (cDNA)。单链cDNA通过DNA聚合酶转化为双链DNA。这些DNA分子...