解析:(1)RTPCR又称逆转录PCR,是利用一条RNA链逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。此过程需要的酶是逆转录酶和Taq酶。大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成。(2)由于大肠杆菌细胞不具备内质网和高尔基体,从而使初始合成的蛋白质不能进一步被加工、包装和转运,而酵母菌是真核生物,生产的产物...
[解析]利用RT﹣PCR获取A基因,包括逆转录和PCR两个过程,所需要的酶主要有逆转录酶和Taq酶。在A基因扩增过程中需要特定的引物,该引物的作用是定位A基因的位置,与模板链结合并为子链的延伸提供起点。 [解析]由于S1不在果肉细胞内起作用,番茄果实不会成熟;同时S1在番茄植株细胞中起作用后会导致番茄植株的乙烯合成减...
(2)进行RT-PCR需要加入的酶有:进行逆转录所需的逆转录酶和进行PCR所需的Taq酶(热稳定性强的DNA聚合酶)。 (3)分析题意可知:抗原-抗体杂交技术关键是要生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体。生产这种抗体的基本思路与生产单克隆抗体的过程相近,具体如下: ...
(1)RT-PCR是指以病毒的RNA为模板通过___过程合成cDNA,并对cDNA进行PCR扩增的过程。进行RT-PCR过程中,需要加入的酶有___。 (2)利用RT-PCR试剂盒对新型冠状病毒进行检测时,除借助上述RT-PCR技术外,还需要有特异性探针。制作该探针的依据是___,利用该探针对新型冠状病毒进行检测的原理是___。 (3)除核酸检测...
(1)根据题意可知,RT-PCR技术是mRNA逆转录为cDNA再进行PCR扩增的过程,其中逆转录过程需要逆转录酶,而PCR技术需要Taq酶(热稳定的DNA聚合酶)的催化。在进行PCR扩增时需要设计两种引物。 (2)将基因C与质粒重组,需要用到的酶有EcoRI和DNA连接酶。本实验中,对质粒进行酶切时,只能单一酶切,不能双酶切,原因是基因C...
D、RT-PCR 技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细胞中基因表达水平,细胞中 RNA 病毒的含量和直 接克隆特定基因的 cDNA 序列,D正确。故选:BC。 据题干信息分析:进行RT-PCR时,RT-PCR是将RNA的逆转录(RT)和cDNA聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术,过程为mRNA→cDNA→DNA;除了在反应体系中加入RNA、逆转录酶、dNTP、...
(2)过程Ⅱ为聚合酶链式扩增反应,首先要将反应体系的温度升高到95℃,让逆转录酶变性失活、使mRNA—cDNA杂合双链解开,该反应体系中所用的Taq酶必需耐受环境温度,即95℃ 。 (3)DNA分子是半保留的方式复制,所以过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增,理论上至少需要2n-1个引物B。 (4)利用RT —PCR技术获取的目...
RT-PCR步骤: 1、收细胞,消化离心后弃上清,再瞬时离心吸干上清。Ep管也必须是无酶的。 2、以下步骤一定要用无酶枪头!!!每管都加入500ul的Trizol,吹打混匀,每管都要换枪头。 3、加100ul的三氯甲烷,剧烈晃动,离心,12000rpm,15min。 4、将离心后的液体吸200ul上清到新的EP管中,做好标记,千万不要吸到...