RT-PCR的指数扩增是一种很灵敏的技术,可以检测很低拷贝数的RNA。RT-PCR广泛应用于遗传病的诊断,并且可以用于定量监测某种RNA的含量。检测基因表达的方法,参见Northern Blot法。RT-PCR的关键步骤是在RNA的反转录,要求RNA模版为完整的且不含DNA、蛋白质等杂质。常用的反转录酶有两种,即鸟类成髓细胞性白细胞病毒...
RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于:分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。合成选择 合成cDNA引物的选择 1. 随机六聚体引物:当特定mRNA由于含有使反转录酶终止的序列而难于拷贝其全长序列时,可采用随机六聚体引物这一...
RT-PCR就是逆转录PCR(Reverse transcription PCR)或称为反转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR),是以RNA为材料应用于PCR扩增中的一种实验方法。首先通过逆转录酶将总RNA或信使RNA(mRNA)转录成互补DNA(cDNA)。其次Taq DNA聚合酶以cDNA为模板进行qPCR扩增。RT-PCR已...
1,最常用的意思:RT,reverse transcription,英文"逆转录"的缩写 2,现在也有人这么解释:RT,RealTime, 英文"实时"的缩写。 这里我们要讲的是逆转录RT-PCR技术。 逆转录RT-PCR原理 什么是逆转录RT-PCR技术? RT- PCR,英文名为 Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,即逆转录PCR,是将RNA的反转录(RT)和...
RT-PCR反应受多个因素影响,如硫酸镁的浓度, 引物退火的温度,扩增的循环数等。 1、建议选择0.5-3.0 mM (相差0.5 mM)的硫酸镁作初步实验。 2、对于具有较高Tm的引物,增加退火和延伸时的温度对反应有利。较高的温度有利于减少非特异的引物结合,因而提高特异产物的得率。
百度试题 题目RT-PCR是指(名词解释) A.反转录聚合酶链式反应B.聚合酶链式反应C.荧光原为杂交D.扩增阻滞突变系统相关知识点: 试题来源: 解析 A 反馈 收藏
2.3逆转录酶和RT-PCR(逆转录酶也就是本期的主角) 逆转录酶(reverse transcriptase)是存在于RNA病毒体内的依赖RNA的DNA聚合酶,至少具有以下三种活性:(1)依赖RNA的DNA聚合酶活性:以RNA为模板合成cDNA第一条链; (2)Rnase水解活性:水解RNA:DNA杂合体中的RNA; ...
RT-PCR:特指反转录PCR (Reverse Transcription-PCR),即以RNA为模板反转录成cDNA,再以cDNA为模板进行PCR扩增。 qPCR:指实时荧光定量PCR(quantitative Real time-PCR ),即PCR过程中每个循环都有数据的实时记录,因此可以对起始模板数量进行精确的分析。 Real time PCR:一般缩写为 qPCR,与qPCR定义相同。
百度试题 结果1 题目RT-PCR的全称是什么?相关知识点: 试题来源: 解析 答案:逆转录聚合酶链式反应(Reverse Transcription PCR) 解析:RT-PCR是一种先将RNA逆转录为cDNA,然后进行PCR扩增的技术。 临床实验室管理反馈 收藏