RPA技术原理重组酶聚合酶扩增（Recombinase Polymerase Amplification, RPA）是等温核酸扩增技术之一。RPA技术由英国TwistDx公司于2006年首次推出。其开发的初衷是为了提供一种快速、简便、灵敏的核酸扩增方法，以弥补PCR技术在复杂设备和时间消耗上的不足。RPA技术的核心在于利用多个重组酶、单链结合蛋白和链置换DNA聚合酶在...
RPA等温扩增技术检测方法 1.电泳法:在RPA的基础上,用凝胶电泳的技术进行终产物检测。 2.EXO探针法:在RPA的基础上,加入了核酸外切酶III(exonuclease III,即exo)和exo荧光探针,核酸外切酶III会特异地切割荧光探针(THF位点),然后荧光集团与淬灭集团分开,发出荧光信号,通过荧光收集的仪器来实时监控荧光值的变化。 图2.E...
RPA等温扩增技术检测方法 1.电泳法:在RPA的基础上,用凝胶电泳的技术进行终产物检测。 2.EXO探针法:在RPA的基础上,加入了核酸外切酶III(exonuclease III,即exo)和exo荧光探针,核酸外切酶III会特异地切割荧光探针(THF位点),然后荧光集团与淬灭集团分开,发出荧光信号,通过荧光收集的仪器来实时监控荧光值的变化。 图2.E...
重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)是一种新型核酸恒温扩增技术,可以在37~42 ℃条件下,10~30 min内实现待测靶标的快速检测。它具有反应灵敏度高、特异性强、对仪器依赖程度低且可整合多种检测模式等优点,特别适用于基层和现场即时检测,可广泛应用于体外诊断、动物疫病、食品安全、生物安全、...
重组酶聚合酶扩增(RPA)技术是一种新型核酸恒温扩增检测技术。该技术可以在37~42 ℃条件下实现待测靶标的快速检测。它具有反应灵敏度高、特异性强、对仪器依赖程度低且可整合多种检测模式等优点,特别适用于基层和现场即时检测。本文从RPA技术...
此外，RPA可以在37-42°C下运行，无需复杂的温度控制设备，非常适合资源匮乏环境下的现场检测，并可以在20 min内得到检测结果，有利于样品的大规模筛选和快速检测。2. 反应机理 重组酶聚合酶扩增技术通过模拟DNA体内扩增，在等温条件下产生目的片段。该技术主要依赖重组酶、单链结合蛋白和链置换DNA聚合酶。重组酶能够...
荧光探针法RPA主要在RPA扩增的基础上，加入了Exonuclease III和exo荧光探针，在RPA扩增过程中Exonuclease III会特异地切割荧光探针（THF位点），导致荧光基团与淬灭基团分开，荧光信号被检测到，通过荧光收集的仪器来实时监控荧光值的变化。翌圣特推出一款Exonuclease III（Cat#14525ES），为RPA扩增技术的广泛应用助力。图2....
(1)RPA是TwistDx公司的专利技术,后来雅培公司通过收购获得了该技术专利,其以RPA为基础的TwistAmp®核酸扩增产品,涵盖了DNA/RNA检测、实时检测/终点法检测,种类齐全,其提供的冻干试剂,无需冷链保存和运输。 (2)RAA是国内厂家的专利技术,主要有杭州众测生物科技有限公司和江苏省奇天基因公司在开发相应的检测试剂及设备...
RPA技术是一种在恒温条件下扩增目标序列的核酸检测技术。它利用DNA重组酶和DNA连接酶,在恒温(37-42摄氏度)下结合引物和目标DNA序列,通过DNA链插入和扩增来放大目标序列。RPA技术不需要高温变性和酶解,可以在短时间内实现DNA扩增。RPA技术还可以直接在复杂的样品中进行扩增,而无需进行纯化提取操作。 对于创伤弧菌的检测...