RPA技术原理重组酶聚合酶扩增（Recombinase Polymerase Amplification, RPA）是等温核酸扩增技术之一。RPA技术由英国TwistDx公司于2006年首次推出。其开发的初衷是为了提供一种快速、简便、灵敏的核酸扩增方法，以弥补PCR技术在复杂设备和时间消耗上的不足。RPA技术的核心在于利用多个重组酶、单链结合蛋白和链置换DNA聚合酶在...
RPA等温扩增技术检测方法 1.电泳法:在RPA的基础上,用凝胶电泳的技术进行终产物检测。 2.EXO探针法:在RPA的基础上,加入了核酸外切酶III(exonuclease III,即exo)和exo荧光探针,核酸外切酶III会特异地切割荧光探针(THF位点),然后荧光集团与淬灭集团分开,发出荧光信号,通过荧光收集的仪器来实时监控荧光值的变化。 图2.E...
RPA等温扩增技术检测方法 1.电泳法:在RPA的基础上,用凝胶电泳的技术进行终产物检测。 2.EXO探针法:在RPA的基础上,加入了核酸外切酶III(exonuclease III,即exo)和exo荧光探针,核酸外切酶III会特异地切割荧光探针(THF位点),然后荧光集团与淬灭集团分开,发出荧光信号,通过荧光收集的仪器来实时监控荧光值的变化。 图2.E...
日前,发表在《分子诊断杂志》(The Journal of Molecular Diagnostics)杂志上的一项研究中,研究人员利用RPA技术开发了一种检测沙眼衣原体的快速、灵敏的新方法,利用该方法在20分钟内即可得出检测结果。 研究人员利用RPA技术直接从患者尿液样本中检测沙眼衣原体,不需要从尿...
荧光探针法RPA主要在RPA扩增的基础上，加入了Exonuclease III和exo荧光探针，在RPA扩增过程中Exonuclease III会特异地切割荧光探针（THF位点），导致荧光基团与淬灭基团分开，荧光信号被检测到，通过荧光收集的仪器来实时监控荧光值的变化。翌圣特推出一款Exonuclease III（Cat#14525ES），为RPA扩增技术的广泛应用助力。图2....
此外，RPA可以在37-42°C下运行，无需复杂的温度控制设备，非常适合资源匮乏环境下的现场检测，并可以在20 min内得到检测结果，有利于样品的大规模筛选和快速检测。2. 反应机理 重组酶聚合酶扩增技术通过模拟DNA体内扩增，在等温条件下产生目的片段。该技术主要依赖重组酶、单链结合蛋白和链置换DNA聚合酶。重组酶能够...
重组酶聚合酶扩增技术(RPA) 1.原理介绍 重组酶聚合酶扩增技术(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)是以T4噬菌体核酸复制机制为原理,通过重组酶蛋白(T4 uvs X)、单链结合蛋白(T4 gp32)和DNA聚合酶(Bsu)的作用,在体外完成核酸的恒温扩增反应。其反应原理如图1A所示:①在ATP参与下,重组酶T4 uvsX分别与上、...
重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification，RPA)是Piepenburg等人在2006年利用参与细胞DNA合成的蛋白重组和修复开发出的一种新的核酸恒温扩增技术。该技术可以在37~42 ℃条件下实现待测靶标的快速检测。它具有反应灵敏度高、特异性强、对仪器依赖程度低且可整合多种检测模式等优点，特别适用于基层和现场...
有了RPA等温扩增技术核酸检测方式,被检测人员再也不用跑到人流量聚集的医院或医疗机构进行核酸检测。医护人员携带简易包装的稳定冻干形式试剂,即可到被检测人员家中或合适的场所进行核酸检测,更加方便、高效。 02 RPA(RoboticProcess Automation)机器人流程自动化 ...