HPLC RP法是一种可靠、高效的分离技术,广泛应用于化学和生物领域。通过调节流动相的组成和流速,HPLC RP法可以实现对样品中化合物的准确分离和定量分析。在实际应用中,需要根据样品性质和分离目标选择合适的柱和检测器,并进行仪器参数的优化。HPLC RP法在制药、食品安全、环境监测、生物医学研究和化妆品工业等领域具有...
HPLC RP法是基于样品与固定相之间的亲疏水性相互作用来进行物质分离的。常用的固定相是疏水性的烷基链,如C18。当样品溶液通过固定相时,极性物质会与固定相表面发生亲和作用,从而被滞留,而非极性物质则会较快地通过。通过调节流动相的成分和流速,可以实现对不同化合物的分离。 二、操作步骤 1. 样品制备:将待测物...
在RP-HPLC中,有机相的类型经常可以影响选择性,而在添加离液剂的RP-HPLC中,有机相如甲醇、乙腈的影响甚至更加明显。如前面分析离液剂的机理提到,离液剂会吸附在固定相的表面,从而形成“准固定相(pseudo-stationary phase)”,从而让固定相带有了电荷,可以与带正电荷的分析物发生电荷作用。因此,离液剂在固定相上的吸附...
实验室对于蛋白质的定量测定有多种方法，如考马斯亮蓝法(Bradford)、福林酚法(Lowry)、凝胶过滤法、质谱法(MS)等，除这些方法外，实验室还可以利用RP-HPLC反相高效液相色谱对蛋白质杂质进行检测。反相高效液相色谱RP-HPLC由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系，基于溶质在固定相和流动相之间的相互作用，...
RP-HPLC是当今液相色谱的最主要的分离模式，几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物的分离。反相色谱法适于分离非极性，极性或离子型化合物，大部分的分析任务皆由反相色谱法完成。反相高效液相色谱法与高效液相色谱法的区别 高效液相色谱法包括正相高效液相色谱法和反相高效液相色谱法。 正相高效...
反相高效液相色谱法（RP-HPLC）是一种常用的分离分析方法，基于高效液相色谱技术，采用非极性固定相和极性流动相的组合，实现样品的分离和检测。原理 在RP-HPLC中，样品在非极性固定相和极性流动相之间的分配作用实现分离。组分在固定相和流动相之间的溶解度差异导致不同的迁移速度，从而实现分离。发展历程和应用领域 ...
在RP-HPLC中,疏水固定相通常是含有C18链或者其他疏水性功能团的硅胶或化学键合硅胶,而样品则是通过疏水作用与固定相发生相互作用。当样品溶解度与固定相相比较大时,样品将与固定相更多地发生作用,分离效果更好。因此,RP-HPLC常用于疏水性化合物的分离。 二、RP-HPLC的应用 1.药学分析:RP-HPLC广泛应用于药学领域,...
在RP-HPLC中,对于可电离的化合物,流动相的pH会影响其电离状态从而改变其疏水性,进而影响其保留。在碱性化合物的反相分析中,当考虑用离子对方法时,需要确保化合物处于完全的质子化,也就是充分带上正电荷,这样才能和离液剂阴离子充分作用。在满足这个要求下,离液效应和pH关系不大。由于很多离液阴离子(如高氯酸根离...
多肽和蛋白质的反相色谱(RP-HPLC)分析法需要“离子对试剂”。 在流动相中加入离子对试剂,以实现良好的峰形。 目前认为,在没有离子对试剂的情况下,硅胶表面的金属杂质是导致蛋白质/多肽峰形较差的原因。 三氟…
说明RP-HPLC法的常用固定相、流动相、适用范围,及流动相中甲醇等有机溶剂浓度变化对被测组分保留时间的影响。相关知识点: 试题来源: 解析 常用固定相——ODS(C18)柱; 流动相——甲醇-水、乙腈-水、四氢呋喃-水; 适用范围——非极性至中等极性的各类分子型化合物; 反馈 收藏 ...