HPLC RP法的操作步骤如下: 1. 准备样品溶液:将待测样品溶解于适当的溶剂中,并通过滤膜过滤以去除固体颗粒。 2. 准备流动相:根据样品性质和分离要求,选择合适的流动相组成,并进行气泡去除。 3. 设置仪器参数:根据样品性质和柱特性,设置合适的流速、柱温和检测器参数。 4. 进样:将样品溶液注入进样器中,控制注...
HPLC RP法是基于样品与固定相之间的亲疏水性相互作用来进行物质分离的。常用的固定相是疏水性的烷基链,如C18。当样品溶液通过固定相时,极性物质会与固定相表面发生亲和作用,从而被滞留,而非极性物质则会较快地通过。通过调节流动相的成分和流速,可以实现对不同化合物的分离。 二、操作步骤 1. 样品制备:将待测物...
在RP-HPLC中,有机相的类型经常可以影响选择性,而在添加离液剂的RP-HPLC中,有机相如甲醇、乙腈的影响甚至更加明显。如前面分析离液剂的机理提到,离液剂会吸附在固定相的表面,从而形成“准固定相(pseudo-stationary phase)”,从而让固定相带有了电荷,可以与带正电荷的分析物发生电荷作用。因此,离液剂在固定相上的吸附...
实验室对于蛋白质的定量测定有多种方法，如考马斯亮蓝法(Bradford)、福林酚法(Lowry)、凝胶过滤法、质谱法(MS)等，除这些方法外，实验室还可以利用RP-HPLC反相高效液相色谱对蛋白质杂质进行检测。反相高效液相色谱RP-HPLC由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系，基于溶质在固定相和流动相之间的相互作用，...
摘要:本文采用高校液相测定了阿莫西林工艺中的原料、中间体和产物中 6-氨基青霉烷酸、D-对羟基苯甘氨酸甲酯、D-对羟基苯甘氨酸、阿莫西林的含量,固定相为:瑞士 Hamilton 反相液相色谱柱 HxSil C18 液相色谱柱(150*4.6mm,5un),乙腈-0.2M 磷酸二氢钠-0.2M 磷酸氢二钠(10:85:5)为流动相,检测波长为 230nm;此...
反相高效液相色谱法（RP-HPLC）使用亲水性的固定相和疏水性的移动相，利用样品分子在移动相和固定相之间的互作用力差异进行分离。一、基本原理：1.疏水性固定相：反相色谱柱通常使用疏水性的固定相材料，如疏水链状碳氢化合物改性的硅胶或封闭的C18链，使分析物在移动相中具有亲水性，与固定相表面发生疏水...
多肽和蛋白质的反相色谱(RP-HPLC)分析法需要“离子对试剂”。 在流动相中加入离子对试剂,以实现良好的峰形。 目前认为,在没有离子对试剂的情况下,硅胶表面的金属杂质是导致蛋白质/多肽峰形较差的原因。 三氟乙酸 三氟乙酸(TFA)是最常用的离子对试剂。将浓度为~0.1%的三氟乙酸加入流动相,会在大多数柱上产生良...
反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定麦汁中的草酸 下载积分: 2990 内容提示: 2005No.10SerialNo.151 CHINA BREWING AnalysisandExamination草酸学名乙二酸,与钙结合后形成的草酸钙是造成啤酒非生物混浊以及喷涌现象的主要原因之一。建立一种简单、准确的草酸测定方法是控制啤酒中草酸含量的首要前提。已有报道的草酸测定方法...
研究人员开发出一种 RP-HPLC 法测定福沙那韦潜在杂质,该方法高效且经全面验证,意义重大。 在艾滋病治疗领域,福沙那韦(Fosamprenavir)作为一种蛋白酶抑制剂,在高效抗逆转录病毒治疗(HAART)方案中发挥着关键作用,它能抑制 HIV 蛋白酶的功能,阻碍病毒复制,从而延缓疾病进展。然而,药物中的杂质可能影响其安全性和有效性。
采用RP-HPLC法同时测定安徽石榴皮、汁中鞣花酸含量时,考察了样品提取过程及样品不同部位对提取物含量的影响。通过酸化提取液可加速提取物石榴鞣花酸的浸出,因提取物石榴鞣花酸具有多酚结构,易氧化,加入维生素C可阻碍提取过程中石榴鞣花酸的氧化变质。通过对石榴汁、皮的相同处理方法,结果表明石榴皮部位鞣花酸含量是...