HPLC RP法是一种可靠、高效的分离技术,广泛应用于化学和生物领域。通过调节流动相的组成和流速,HPLC RP法可以实现对样品中化合物的准确分离和定量分析。在实际应用中,需要根据样品性质和分离目标选择合适的柱和检测器,并进行仪器参数的优化。HPLC RP法在制药、食品安全、环境监测、生物医学研究和化妆品工业等领域具有...
HPLC RP法是基于样品与固定相之间的亲疏水性相互作用来进行物质分离的。常用的固定相是疏水性的烷基链,如C18。当样品溶液通过固定相时,极性物质会与固定相表面发生亲和作用,从而被滞留,而非极性物质则会较快地通过。通过调节流动相的成分和流速,可以实现对不同化合物的分离。 二、操作步骤 1. 样品制备:将待测物...
在RP-HPLC中,有机相的类型经常可以影响选择性,而在添加离液剂的RP-HPLC中,有机相如甲醇、乙腈的影响甚至更加明显。如前面分析离液剂的机理提到,离液剂会吸附在固定相的表面,从而形成“准固定相(pseudo-stationary phase)”,从而让固定相带有了电荷,可以与带正电荷的分析物发生电荷作用。因此,离液剂在固定相上的吸附...
实验室对于蛋白质的定量测定有多种方法，如考马斯亮蓝法(Bradford)、福林酚法(Lowry)、凝胶过滤法、质谱法(MS)等，除这些方法外，实验室还可以利用RP-HPLC反相高效液相色谱对蛋白质杂质进行检测。反相高效液相色谱RP-HPLC由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系，基于溶质在固定相和流动相之间的相互作用，...
多肽和蛋白质的反相色谱(RP-HPLC)分析法需要“离子对试剂”。 在流动相中加入离子对试剂,以实现良好的峰形。 目前认为,在没有离子对试剂的情况下,硅胶表面的金属杂质是导致蛋白质/多肽峰形较差的原因。 三氟乙酸 三氟乙酸(TFA)是最常用的离子对试剂。将浓度为~0.1%的三氟乙酸加入流动相,会在大多数柱上产生良...
反相高效液相色谱法（RP-HPLC）是一种常用的分离分析方法，基于高效液相色谱技术，采用非极性固定相和极性流动相的组合，实现样品的分离和检测。原理 在RP-HPLC中，样品在非极性固定相和极性流动相之间的分配作用实现分离。组分在固定相和流动相之间的溶解度差异导致不同的迁移速度，从而实现分离。发展历程和应用领域 ...
在RP-HPLC中,疏水固定相通常是含有C18链或者其他疏水性功能团的硅胶或化学键合硅胶,而样品则是通过疏水作用与固定相发生相互作用。当样品溶解度与固定相相比较大时,样品将与固定相更多地发生作用,分离效果更好。因此,RP-HPLC常用于疏水性化合物的分离。 二、RP-HPLC的应用 1.药学分析:RP-HPLC广泛应用于药学领域,...
RP-HPLC 是一种有效的多肽/蛋白纯化工具。通过RP-HPLC 法可以把粗品中的杂质分离得到目标多肽/蛋白。收集到的多肽、蛋白片段可以用于进一步研究,也可以作为治liao药物。 在蛋白/多肽分析过程中,色谱条件优化的目标是优化分辨率和保留时间。 制备色谱法分离蛋白/多肽时,色谱条件的开发主要是三个参数的优化(参见图1)。
反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定麦汁中的草酸 下载积分: 2990 内容提示: 2005No.10SerialNo.151 CHINA BREWING AnalysisandExamination草酸学名乙二酸,与钙结合后形成的草酸钙是造成啤酒非生物混浊以及喷涌现象的主要原因之一。建立一种简单、准确的草酸测定方法是控制啤酒中草酸含量的首要前提。已有报道的草酸测定方法...