总的来说,RIP、RNA pull-down和MeRIP是用于研究RNA与蛋白质相互作用或RNA甲基化的重要实验技术。它们各自适用于不同的研究场景,具有一定的优势和局限性。选择合适的技术取决于研究问题的具体需求和样本类型。 案例分享 CircPVT1 promotes proliferation of lung squamous cell carcinoma
RNA Pull-down和RNA免疫沉淀(RNA Immunoprecipitation, RIP)是研究RNA和蛋白互作的主流技术。RNA Pull-down更倾向于通过目标RNA(已知的RNA)去找到相互作用的未知蛋白,而RIP技术则更多应用于通过目标蛋白(已知蛋白)去找到相互作用的未知RNA。技术原理 RNA Pull-down用于研究RNA与蛋白质之间的相互作用。这项技术在...
随后利用RNA Pull-Down技术鉴定与ELENA1结合的中介体亚基,结果显示MED19a与MED26b均能在体外与ELENA1 RNA结合,同时利用elf18处理MED19a/MED26b敲除株,发现只有MED19a敲除株中PR1表达情况显示出与ELENA1敲除株系相似的趋势。进一步利用GFP标记法、TriFC、RIP实验证明中介体亚基MED19a与ELENA1在体内也存在相互作用。以上...
除RIP和RNA pull Down以外,凝胶迁移或电泳迁移率检测(Electrophoretic Mobility Shift Assay, EMSA),也称为凝胶阻滞实验或DNA结合实验,是一种广泛应用于分子生物学的研究技术,也可以用于研究蛋白质(尤其是转录因子)与DNA或RNA之间的相互作用。基本原理 EMSA的基本原理是利用凝胶电泳技术来观察蛋白质与DNA或RNA形成...
➤ 数据验证:建议结合RIP(RNA结合蛋白免疫沉淀)技术交叉验证结果。RNA pull down实验在生命科学研究中发挥着重要的作用,为解决更多生物学难题提供了强有力的技术支撑。武汉金开瑞能够提供包括RNA pull down 、RIP、EMSA、双荧光素酶等技术服务,从方案流程设计到技术试验执行,从科研技术服务到成品试剂盒提供,...
3、判定RIP实验成功的标准,是能够在IP泳道检测到诱饵蛋白信号,且IgG泳道检测不到;如果IgG泳道也检测到诱饵蛋白,说明该蛋白能够与所有IgG类的抗体结合,只能换别的实验如RNA pulldown来验证。4、通过qPCR检测猎物RNA,若IP组相比于IgG组有显著富集效果,说明诱饵蛋白和猎物RNA有互作。主要应用 RNA-蛋白质互作研究 ...
RIP和RNA pulldown都是研究RNA和蛋白相互作用的经典方法,只是出发点不一样而已。 RIP,RNA 结合蛋白便宜共沉淀,是从蛋白出发研究蛋白RNA相互作用的技术。就是已知一个蛋白,推测会与你的目的RNA相互作用,用蛋白的抗体做免疫共沉淀,把蛋白结合的RNA富集出来并鉴定目的RNA,以证实蛋白与RNA的相互作用。 RNA pulldown是从...
要想进行深层次的挖掘,可以研究其作用机制,RNA pull down、RIP、双荧光素酶等实验技术,检测与目标RNA相互作用的蛋白质或RNA,进一步揭示RNA的生物学功能。然后在动物或细胞模型中验证RNA的功能和调控机制,进一步确认其在生理和病理条件下的重要性。图2 LncRNA研究思路 深入了解LncRNA作用机制能够帮助我们识别疾病的...
➤温度敏感:裂解和洗脱步骤需精确控温,避免RNA降解或蛋白失活。➤磁珠处理:洗涤时避免磁珠干涸,每次需充分重悬。➤数据验证:建议结合RIP(RNA结合蛋白免疫沉淀)技术交叉验证结果。RNA pull down实验在生命科学研究中发挥着重要的作用,为解决更多生物学难题提供了强有力的技术支撑。武汉金开瑞能够提供包括RNA pull ...
使用igv手把手教你读懂、理解m6a-seq、rip-seq 、chip-seq等表观数据的peaks含义,以及制作峰度图 2.0万 6 05:45 App 生动形象地为你讲解pull down实验,还不快来围观! 6609 3 33:22 App RIP试剂盒实验操作步骤 3231 1 01:01:53 App 解析|关于RNA pull down 看完这个视频就够了! 8280 4 46:11 App ...