伯远医学拥有一流的技术团队、丰富的项目经验，提供专业RNA Pull-down技术服务，适用于RNA与蛋白结合的领域研究，欢迎大家前来咨询RNA Pull-down实验。参考文献 Barnes C, Kanhere A. Identification of RNA–protein interactions through in vitro rna Pull-down assays[J]. Polycomb Group Proteins: Methods and Prot...
图2 RNA Pull-down实验流程图(Panda et al., 2016)。 RNA Pull-down技术实验流程主要包括以下几个步骤: (1)构建含目的基因序列质粒:选择自己感兴趣的基因,根据其序列用同源重组方式或全基因合成构建含目的基因序列质粒;并测序验证序列准确性,并提取含目的基因序列质粒备用; (2)转录模板的获取:T7 RNA聚合酶特异...
在摇床上室温摇动10 min，摇动速度为60-70 rpm。水洗涤：弃银染终止液，加入100 ml Milli-Q级纯水或双蒸水，在摇床上室温摇动2-5 min，摇动速度为60-70 rpm。保存：可在Milli-Q级纯水或双蒸水中保存。或采用适当的方式制备成干胶。十、实验结果 10.1 WB预实验验证抗体质量（WB项目-质控1）例如：结果说明...
本次实验的目的是使用RNA-Pull down-MS或者RNA-Pull down-WB的方法,通过体外转录法标记生物素RNA探针,在目的细胞中通过目的探针把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,经过分离纯化并对结合在复合物上的蛋白进行MS或WB分析,寻找目的RNA的靶标蛋白,或在不同遗传背景或处理条件下的互作变化。 广州基云生物拥有资深的项目管理...
RNA pull down 实验步骤1、构建 RNA 过表达质粒：基因合成 +测序验证；2、体外转录模板准备：设计含 T7 启动子引物，PCR 扩增得到转录模板；3、体外转录：以 PCR 产物为模板，体外转录得到目的 RNA；4、RNA pull down ：通过磁珠 -RNA 探针复合物富集互作的蛋白；5、银染质检：SDS -PAGE 电泳银染检测富集蛋白...
4997 -- 1:11 App RNA-pull down实验原理 3562 1 4:56 App 【一次搞懂pull down 实验(上)】本视频用钓鱼来比喻实验原理,以动画的形式生动形象的进行讲解,特别适合初学pull down 实验的同学,快来学习吧。 3145 1 1:01:53 App 解析|关于RNA pull down 看完这个视频就够了! 3253 -- 12:18 App 【文...
RNA-Pull down实验详细操作方法步骤: 一、细胞收集(对于单层细胞或贴壁细胞) 准备细胞5E7细胞。用10 mL冰冷的PBS洗涤培养瓶或平板上的细胞两次。加入10 mL冰冷的PBS。从每个培养瓶或平板上刮下细胞,然后转移到离心管。通过在4°C下以1500 rpm离心5 min来收集细胞,并丢弃上清液。细胞沉淀-80℃保存。
嘿,大家好!今天我们来聊聊RNA Pull down实验,这可是个挺有意思的实验哦!不过,这个实验步骤有点多,咱们一步一步来,慢慢搞定。 RNA提取 🧬 首先,咱们得提取RNA。这个步骤其实还挺关键的,毕竟RNA这东西很脆弱,稍微不注意就搞砸了。具体操作如下: 准备样品:把你的Input样品、sense、antisense和beads分别放进1ml的...
Pull down技术可以确定已知的蛋白与钓出蛋白或已纯化的相关蛋白间的相互作用关系,从体外转录或翻译体系中检测出蛋白相互作用关系。RNA pull-down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验手段之一。RNA pull down是使用体外转录法标记生物素RNA探针,然...
上次Andy介绍到RNA pull-down的原理和做该实验的准备工作,在万事俱备以后,就可以开始为期三天的正式实验了。我们这次的实验流程是采用的生物素标记的磁珠法,也是比较常规的一种方法~ RNA pull-down assay using Streptavidin magnetic beads 1 RNA pull-down 第一天——生物素探针标记RNA ...