伯远医学拥有一流的技术团队、丰富的项目经验，提供专业RNA Pull-down技术服务，适用于RNA与蛋白结合的领域研究，欢迎大家前来咨询RNA Pull-down实验。参考文献 Barnes C, Kanhere A. Identification of RNA–protein interactions through in vitro rna Pull-down assays[J]. Polycomb Group Proteins: Methods and Prot...
图2 RNA Pull-down实验流程图(Panda et al., 2016)。 RNA Pull-down技术实验流程主要包括以下几个步骤: (1)构建含目的基因序列质粒:选择自己感兴趣的基因,根据其序列用同源重组方式或全基因合成构建含目的基因序列质粒;并测序验证序列准确性,并提取含目的基因序列质粒备用; (2)转录模板的获取:T7 RNA聚合酶特异...
pulldown 后需要尽量洗涤干净,建议加入洗涤液先用枪吹打混匀后进行摇匀洗涤,磁力架收集磁珠后用小型掌心离心机离心 5s 再用小枪头将残留液体彻底吸除干净,或者增加洗涤时间。 RNA pulldown 是体外实验,非特异性结合风险较高,建议实验组和对照组同时打质谱,以便排除非特异性结合蛋白。 4、如果按照 RNA pulldown 说明...
4997 -- 1:11 App RNA-pull down实验原理 3562 1 4:56 App 【一次搞懂pull down 实验(上)】本视频用钓鱼来比喻实验原理,以动画的形式生动形象的进行讲解,特别适合初学pull down 实验的同学,快来学习吧。 3145 1 1:01:53 App 解析|关于RNA pull down 看完这个视频就够了! 3253 -- 12:18 App 【文...
RNA-Pull down实验详细操作方法步骤：一、细胞收集(对于单层细胞或贴壁细胞)准备细胞5E7细胞。用10 mL冰冷的PBS洗涤培养瓶或平板上的细胞两次。加入10 mL冰冷的PBS。从每个培养瓶或平板上刮下细胞，然后转移到离心管。通过在4°C下以1500 rpm离心5 min来收集细胞，并丢弃上清液。细胞沉淀-80℃保存。二、细胞裂解 ...
RNA pull down 实验步骤1、构建 RNA 过表达质粒：基因合成 +测序验证；2、体外转录模板准备：设计含 T7 启动子引物，PCR 扩增得到转录模板；3、体外转录：以 PCR 产物为模板，体外转录得到目的 RNA；4、RNA pull down ：通过磁珠 -RNA 探针复合物富集互作的蛋白；5、银染质检：SDS -PAGE 电泳银染检测富集蛋白...
RNA-Pull down实验详细操作方法步骤: 一、细胞收集(对于单层细胞或贴壁细胞) 准备细胞5E7细胞。用10 mL冰冷的PBS洗涤培养瓶或平板上的细胞两次。加入10 mL冰冷的PBS。从每个培养瓶或平板上刮下细胞,然后转移到离心管。通过在4°C下以1500 rpm离心5 min来收集细胞,并丢弃上清液。细胞沉淀-80℃保存。
嘿,大家好!今天我们来聊聊RNA Pull down实验,这可是个挺有意思的实验哦!不过,这个实验步骤有点多,咱们一步一步来,慢慢搞定。 RNA提取 🧬 首先,咱们得提取RNA。这个步骤其实还挺关键的,毕竟RNA这东西很脆弱,稍微不注意就搞砸了。具体操作如下: 准备样品:把你的Input样品、sense、antisense和beads分别放进1ml的...
RNA pull-down用于检测RNA-蛋白质、或RNA-RNA之间相互作用的技术,其基本原理是:利用带标签的目标RNA探针与待测蛋白质或RNA进行体外或体内结合,通过亲和作用将复合物分离出来,之后采用Western Blot、质谱技术检测结合蛋白,或采用qPCR、测序技术检测结合RNA。
上次Andy介绍到RNA pull-down的原理和做该实验的准备工作,在万事俱备以后,就可以开始为期三天的正式实验了。我们这次的实验流程是采用的生物素标记的磁珠法,也是比较常规的一种方法~ RNA pull-down assay using Streptavidin magnetic beads 1 RNA pull-down 第一天——生物素探针标记RNA ...