RNA pull down-实验简介 RNA pull down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验方法之一。使⽤体外转录法标记⽣物素RNA探针，然后与胞浆蛋⽩提取液孵育，形成RNA-蛋⽩质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合，从⽽与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后，通过WB 实验检测特定的RNA 结...
RNA pull-down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验手段之一。RNA pull down是使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物...
RNA pull down:RNA沉淀检测,是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验方法之一。使用体外转录将RNA进行生物素标记,并与细胞蛋白裂解液孵育,形成RNA-蛋白复合物。复合物通过磁珠结合后分离,复合物纯化洗脱后通过Western blot验证检测特性的蛋白。若筛选可能结合的蛋白通过质谱实验进行检测筛选。 实验流程: 2.1生物...
RNA Pull-down用于研究RNA与蛋白质之间的相互作用。这项技术在细胞裂解液中使用生物素标记的RNA探针来捕获与其结合的蛋白质。随后，通过链霉亲和素偶联的磁珠将这些RNA-蛋白质复合物分离出来，从而实现对结合蛋白的富集。之后可以通过质谱分析、Western blot等方法鉴定所富集的蛋白质。图2 RNA Pull-down实验流程图（Pan...
RNA pull down是用于检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间互作的实验手段。RNA pull down使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过Western Blot实验检测特定的RNA结合蛋白是否与RNA相互作用。也...
RNA pull-down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验手段之一。RNA pull-down使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通...
RNA pull down是用于检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间互作的实验手段。RNA pull down使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过Western Blot实验检测特定的RNA结合蛋白是否与RNA相互作用。也...
在RNA pull-down实验中,首先需要设计和合成诱饵RNA。诱饵RNA通常由目标RNA的互补序列组成。这个互补序列可以是RNA本身的互补链,也可以是合成的肽核苷酸。 2.修饰诱饵RNA 为了更好地进行pull-down实验,诱饵RNA通常会被修饰。最常见的修饰包括在RNA的5'末端或3'末端引入亲和标签,如生物素或荧光染料。这些标签可以用于...
RNA拉down实验是一种发展自蛋白免疫沉淀实验(immunoprecipitation,IP)的新技术,简称“RNA-PD”。它是基于蛋白质-RNA互作的一种检测方法,主要用于鉴定哪些RNA被某种蛋白结合,从而发现RNA的功能性相互作用,从而可以让我们更深入的了解RNA的功能。 二、原理 RNA拉down实验将靶蛋白与可结合的核酸探针或核酸抗体结合,然后将...
RNA pull down是一种用于研究RNA与RNA结合蛋白的相互作用的实验技术。它基于RNA的亲和性和结对能力,结合亲和纯化技术和西方印迹分析,可以探究RNA与特定蛋白质之间的相互作用关系。 原理: RNA pull down实验分为两个步骤:RNA的共价固定和RNA与RNA结合蛋白的识别。 1. RNA的共价固定:在这一步骤中,使用一种活性交联剂...