GST pull down(GST融合蛋白沉降技术)是体外检测蛋白相互作用的常用方法,一般来说,GST融合蛋白pull down方法用于两个方面:一是鉴定能与已知融合蛋白相互作用的未知蛋白质;二是鉴定两个已知蛋白质之间是否存在相互作用。为排除假阳性所设的一组对照实验是在没有诱饵蛋白存在的条件下,将样品结合到GST上。该对照可以是表...
RIP、RNA pull-down和MeRIP等实验技术是我们深入研究RNA和蛋白质相互作用的关键工具。RIP用于选择性地富集与特定RNA相互作用的蛋白质,RNA pull-down通过RNA探针捕获相互作用蛋白质,而MeRIP则用于甲基化RNA的研究。下面就让我们详细了解一下—— RIP RIP,全称为RNA Binding Protein Immunoprecipitation Assay,RNA 结合蛋白...
RNA pull-down assay using Streptavidin magnetic beads 1.RNA pull-down 第一天——生物素探针标记RNA 1)前期准备:取出Pierce™ RNA 3' End Desthiobiotinylation Kit,将试剂盒中的PEG及DMSO置于常温,其余组分置于冰上融化,也可将PEG放于37摄氏度融化;打开PCR仪; 2)依照RNA母管含量,用DEPC水溶解RNA,我们通常...
A:细胞、动物/植物组织、菌体都可以做DNA pull down, 我们还可以做的检测实验具体如下: (1) RNA-蛋白/RNA互作及定位:RNA pull down、RIP、fish等; (2) DNA-蛋白互作:DNA pull down、ChIP、EMSA、双荧光素酶、酵母单杂等; (3) 蛋白-蛋白互作:GST/his pull down、CoIP、酵母双杂等; (4) 细胞学检测:...
上次Andy介绍到RNA pull-down的原理和做该实验的准备工作,在万事俱备以后,就可以开始为期三天的正式实验了。我们这次的实验流程是采用的生物素标记的磁珠法,也是比较常规的一种方法~ RNA pull-down assay using Streptavidin magnetic beads 1 RNA pull-down 第一天——生物素探针标记RNA ...
1. RNA Pull Down Assay(1) 为了鉴定特定的RNA分子是否与某一种特定的蛋白结合,研究人员根据DNA-Protein实验中DNA Pull down的实验方法进行改进,使其在RNA上实现。 技术步骤如下: (1)设计末端携带T7 RNA Promoter的引物扩增DNA片段; (2)利用T7 RNA polymerase 进行转录,转录过程添加携带生物素的dNTP,使转录本...
上次Andy介绍到RNA pull-down的原理和做该实验的准备工作,在万事俱备以后,就可以开始为期三天的正式实验了。我们这次的实验流程是采用的生物素标记的磁珠法,也是比较常规的一种方法~ RNA pull-down assay using Streptavidin magnetic beads 1 RNA pull-down...
At BOC Sciences, we offer cutting-edge RNA pull down assay services to facilitate the study of RNA-protein interactions with precision and reliability. What is RNA Pull Down? Currently, methods for studying RNA-protein interactions can be broadly categorized into two types. One focuses on the ...
RNA pull-down assay using nuclear extract 1. Biotin-labeled RNAs were in vitro transcribed with the Biotin RNA Labeling Mix (Roche) and T7 RNA polymerase (Promega), treated with RNase-free DNase I (Promega) and purified with RNeasy Mini Kit (QIAGEN).2. Biotin-HRP Northern blot was ...
RNA pull-down assay using nuclear extract 1. Biotin-labeled RNAs were in vitro transcribed with the Biotin RNA Labeling Mix (Roche) and T7 RNA polymerase (Promega), treated with RNase-free DNase I (Promega) and purified with RNeasy Mini Kit (QIAGEN).2. Biotin-HRP Northern blot was ...