RIP-qPCR是一种检测细胞内蛋白/RNA互作的靶向验证技术。该技术通过联合免疫共沉淀技术和RT-qPCR检测技术，对目的蛋白在特定细胞/组织内的蛋白/RNA互作关系进行验证，明确蛋白/RNA的相互作用关系。该技术适用于目的蛋白在特定细胞/组织中的蛋白/RNA互作检测验证，或用于不同遗传背景/实验条件下的互作差异研究。因此，该...
RIP-qPCR:用于验证目的蛋白和候选RNA的相互作用关系,或用于不同遗传背景/实验条件下的互作变化。 RIP-qPCR是一种检测细胞内蛋白/RNA互作的靶向验证技术。该技术通过联合免疫共沉淀技术和RT-qPCR检测技术,对目的蛋白在特定细胞/组织内的蛋白/RNA互作关系进行验证,明确蛋白/RNA的相互作用关系。该技术适用于目的蛋白在特定...
4.将PCR反应管置于热循环器中。5.启动以下RT反应程序：37℃,1 h; 95℃, 5 min, 4℃保存。6.取下PCR管。用180 μL无核酸酶水（稀释10倍）稀释产物。产物可以存储在-20°C。六、 qPCR检测 在qPCR管中配制如下混合液 2.按下列条件进行qPCR反应 七、实验结果 7.1抗体在细胞样本中表达验证 （质控1）例如...
4.将PCR反应管置于热循环器中。 5.启动以下RT反应程序:37℃,1 h; 95℃, 5 min, 4℃保存。 6.取下PCR管。用180 μL无核酸酶水(稀释10倍)稀释产物。产物可以存储在-20°C。 六、 qPCR检测 在qPCR管中配制如下混合液 2.按下列条件进行qPCR反应 七、实验结果 7.1抗体在细胞样本中表达验证(质控1) 例如...
RIP-qPCR实验技术,是一种研究细胞内RNA与蛋白质相互作用的重要方法,具有广泛的应用场景。首先,在转录后调控研究中,RIP-qPCR可用于识别与特定RNA结合蛋白(RBP)相互作用的RNA分子,从而揭示RBP在转录后调控网络中的功能。这有助于深入了解基因表达的调控机制,包括mRNA稳定性、剪接和翻译等过程。其次,RIP-qPCR可用于验证...
5.启动以下RT反应程序:37℃,1 h; 95℃, 5 min, 4℃保存。 6.取下PCR管。用180 μL无核酸酶水(稀释10倍)稀释产物。产物可以存储在-20°C。 六、 qPCR检测 在qPCR管中配制如下混合液 2.按下列条件进行qPCR反应 七、实验结果 7.1抗体在细胞样本中表达验证(质控1) ...
RNA免疫沉淀（RNA immunoprecipitation，RIP）是一种基于抗体的技术，可用于定位体内RNA-蛋白质相互作用。背景说明 应用针对目标蛋白的抗体将RNA结合蛋白（RBP）以及RNA一起进行免疫沉淀，分离纯化后，可通过RT-qPCR、微阵列（RIP-Chip）或高通量测序（RIP-Seq）等手段对结合转录RNA（mRNA、非编码RNA或病毒RNA）进行分析...
RIP-qPCR实验技术具有高特异性和灵敏度,能够准确测量RNA与蛋白质的相互作用。浙江RNA蛋白相互作用RIP-RT-PCR RNA结合蛋白-RNA复合物的免疫沉淀(RIP)免疫沉淀方法: 1.制备RIP免疫共沉淀缓冲液。每次免疫沉淀需要900μL的RIP免疫沉淀缓冲液。每个反应在860µL的RIP洗涤缓冲液中加入35μL的0.5MEDTA和5µL的RNase...
j)加入DNA酶进一步清除DNA杂质。将 RNA 逆转录为 cDNA a)根据制造商的说明，使用逆转录 DNA 酶处理 RNA，逆转录为cDNA后备用。对cDNA样本进行qPCR、微阵列或测序进行分析 常见问题及解决方 1.无法沉淀目标蛋白 可能原因：抗体选择和使用过程存在问题 解决方案：IP或者WB测试抗体可以与目标RBP结合 ...
RIP-qPCR技术是一种用于验证细胞内蛋白与RNA相互作用的重要验证手段，尤其适用于探究转录后调控机制和RBP蛋白结合谱的研究。该技术结合免疫共沉淀和RT-qPCR，旨在揭示目的蛋白在不同条件下的互作变化，是研究细胞内调控网络的关键工具。其价值主要体现在两个方面：首先，蛋白与RNA的互作数据对于深入理解转录后...