目标基因的qPCR产物长度越长、GC含量越高,Tm值越大。不同的qPCR产物因其长度与GC含量不同,它们的Tm值大小也不一样。 根据此原理,我们可以知道。如果qPCR扩增体系不特异,出现一个非特异性扩增产物,qPCR最终的产物由目的产物+非特异性产物共同构成,因两者长度与GC含量不同,在融解曲线上会表现出两个Tm值,即两个波...
分别种两小皿(3.5cm)细胞,一皿加药,另外一皿加对照。处理一段时间之后,分别收细胞提RNA,逆转录,然后准备做qPCR,这个时候我们需要做的qPCR孔如下: 注意这里面要区别一个概念是“独立实验重复”和“PCR重复”,上面p53和GAPDH都有三个PCR孔,这是PCR重复,...
通过溶解曲线分析,88个检测片段中有86个(97.7%)目标片段有效扩增,说明Hieff Unicon® Power预混液引物兼容性强,具备高特异性扩增、高检出率的特点。 2. 超高特异性,保证了Ct值的真实性 图2. Hieff® Unicon Power预混液扩增高度特异,Ct值结果可信度高 以1 ng人gDNA为模板,使用不同品牌预混液按照标准扩增...
3️⃣ Ct值🔍:荧光信号达到阈值时的循环数,是定量PCR的关键参数。了解Ct值的计算方法和影响因素,有助于更准确地解读实验结果。通过这些解析,相信你能更好地理解qPCR结果,为后续实验提供有力支持!🎉👏0 0 发表评论 发表 作者最近动态 文竹淤泥越山丘 2024-11-28 🎤 直播间开场白大集合:轻松吸引观众!
通常得到qPCR结果我们要怎样进行统计分析呢?本文通过实例,针对不同的实验目的从如何进行实验设计到结果分析都将一步步为大家解答。 实例: 现需要检测某一药物对细胞培养液中p53 mRNA水平的影响。那么,从实验设计到结果分析我们该如何做呢? 实验设计: 种两小皿细胞(3.5cm),其中一皿加药,另一皿加对照。处理一段时间...
原因分析:如果引物跨内含子,但内含子很短,且gDNA没有去除干净,此时gDNA和cDNA的信号都会被检测到,形成双峰。 解决办法:去除gDNA.或采用探针法; 8.2 引物特异性不好 有非特异性扩增;重新设计引物或使用探针法。 8.3 有引物二聚体:重新设计引物。 强烈建议:进行一次qPCR实验都会让我们多多少少付出一定的心血,所以...
南京诺唯赞生物科技有限公司对于SYBR、TaqMan探针的设计,实验数据和常见问题的分析。, 视频播放量 26.2万播放、弹幕量 862、点赞数 7536、投硬币枚数 1936、收藏人数 23804、转发人数 5009, 视频作者 砚雨阁, 作者简介 ,相关视频:感动哭II终于有人把QPCR实验一次性说清楚
通过对qPCR数据的分析,我们得到了基因在样本中的表达量数据,并发现了一些差异表达的基因。进一步的功能分析结果表明,这些差异表达基因可能与特定的生物学过程和通路相关联。这些结果为我们进一步的研究提供了重要的线索和方向。 在未来的研究中,我们可以进一步验证这些差异表达基因的生物学意义,并探索它们在疾病发展和治疗...
qPCR实验结果分析的几个注意事项 一、Ct值大于等于36的结果是不太行的,因为在35个循环以后,Ct值的变化会比较大,数据会变得不可信。如果有这样的数据,建议重新实验,检查一下是不是模板稀释浓度不对,或者反应体系需要优化,例如引物是否需要重新设计。 二、技术重复的复孔,Ct值的差别应该不大于0.5Ct;因为技术重复的各...