因为这里的R值仅仅是每个待检样本与对应内参基因的比值差。那如何考虑这个问题呢?很简单,对上面推导得到的所有样本和control组的2^(-△Ct),均除以control组的2^(-△Ct),即可得到2^(-△△Ct);好,到这里,就明白了qPCR数据分析中△△Ct法的计算原理及推导过程。【实验设计】假设需要研究光照时间对小麦LIGHT基因...
(a)Ct:表示的是循环阈值,基因和管家基因(内参,一般是β-Actin或者GAPD或者α-tubulin等,具体内参根据组织或者细胞而定)有其对应的Ct值; (b)△Ct:表示的基因Ct值减去管家基因Ct值(即: △Ct =Gene△Ct- Housekeeping gene Ct); (c)参考Ct:一般选择对照组的△Ct的均值(即:means/average of NC group △Ct...
这个qPCR计算2^-△△Ct是万能模板,如下是计算每个样本目的基因的🔺CT(看箭头的公式): 接着是用POWER函数计算每个样本目的基因的2-🔺CT(看箭头的公式): 再计算对照组的平均值2-🔺CT: 最后用每个样本的2-🔺CT除以对照组的平均值2-🔺CT...
【实验】普通PCR、荧光定量RT-qPCR、数字PCR的基本原理和操作方法,注意事项,SYBR GREEN, Taq Man探针 植物百科 32:22 RT-PCR(qPCR)实时荧光定量PCR,ABI StepOnePlas仪器操作 和我谈谈 27:27 qPCR的Ct值(Cq值)的分析 红成笑 25070 07:12 RT-PCR仪后半部分结果处理 ...
第二步、差异分析:打开第二份万能模板,在患者和健康人那二列输入我们刚才得到的2^-△△Ct值,就自动分析好和出图了: 由此,我们知道Wnt4基因在患者中表达增高,但是P大于0.05,没有统计学意义。 有了这个Excel模板,操作就显得非常方便...
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师兄,我想问一下,我想用qPCR数据做个热图,但是我的数据control组的2-△△Ct值的均值算出来都会在1的上下浮动,就导致热图中control那一列颜色不均一,处理组上下调信息没有那么直观。我有看到别人文章里面control组都是1,没有上下浮动的情况,请问这是怎么做到的呀,是在算-△△CT的时候就将control组的三个技术重...
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