CT值的正常范围一般在15到35之间。如果CT值小于15,那就说明荧光阈值还没到达,数据可能不太靠谱。而CT值大于35的情况呢,基本上就没啥意义了。内参的CT值一般要低于25。CT值越大,数据的重复性就越差。一般来说,CT值超过32的数据分析就要小心了。CT值越高,模板浓度就越低,这时候你可能需要提高模板浓度。反之,C...
2.Ct值的范围 Ct值的范围为15-35。Ct值小于15,认为扩增在基线期范围内,未达到荧光阈值。理想情况下,Ct值与模板起始拷贝数的对数存在线性关系,也就是标准曲线。通过标准曲线,扩增效率为100%时,计算出基因单个拷贝数定量的Ct值在35左右,若大于35,理论上模板起始拷贝数小于1,可认为无意义。 对于不同的基因Ct范围...
Ct值的范围:在正常情况下,Ct值的范围通常在15-35之间。Ct值小于15可能意味着扩增在基线期范围内,未达到荧光阈值;而Ct值大于35则可能意味着模板起始拷贝数过低,扩增效率不佳或存在非特异性扩增,结果无意义。
CT 值应该在合理的范围内,一般来说,CT 值应该在 15-35 之间。 4.内参基因:如果实验中使用了内参基因,内参基因的 CT 值应该稳定且在合理范围内。 5.重复性:qPCR 实验应该具有良好的重复性,即相同条件下重复实验得到的结果应该相似。 6.溶解曲线:单峰无杂峰,TM在75-90...
百度试题 题目QPCR实验中Ct值的合理范围是() A.12-38B.15-35C.18-38D.18-32相关知识点: 试题来源: 解析 B 反馈 收藏
可能是基线范围设置不当,这种一般是由于模板量过高导致的。建议减小基线的终点值(一般建议设置为Ct值-4),调整后见下图。 扩增曲线平台期锯齿状 1)RNA纯度低,建议梯度加大模板稀释倍数看优化效果或重新制备高纯度RNA重新实验。 2)仪器长时间未校准,建议定期进行仪器校准保养。
正常情况下,CT值应落在12~18的范围内。如果qPCR中没有CT值,可能是以下原因导致的: 🧬 模板量不足或降解:确保模板DNA的量足够,并且没有降解。 🔍 引物或探针问题:检查引物和探针的设计和序列,确保它们能够有效地与目标基因结合。 📏 阈值位置设置不正确:调整阈值位置,使其能够正确识别荧光信号的起始点。
首先,我们得知道Ct值的参考范围。当你把待测模板稀释到一定程度后,你会发现并不是所有梯度下的Ct值都满足线性范围。只有那些在线性范围内的Ct值才能用来进行后续的定量计算。所以,一般建议的Ct值范围如下: 内参Ct值:建议在15-25之间,更可信的是18-22。 目的基因Ct值:建议在15-33之间,更可信的是18-28。 不符...