实验组GST-pull down第三列的实验结果可以看出KU-HIS，GST的条带中只检测到了GST，说明KU-HIS没有连接到亲和纯化柱上而被洗脱掉了。而在第四列的实验结果可以分别检测到GST与HIS 标签说明KU与TOP6发生了相互作用使得在条带中分别检测到了GST与HIS标签。
在pulldown实验中，通过检测实验结果中的条带bands来确定蛋白质与染色质交互作用的情况。在进行pulldown实验后，会经过电泳分离蛋白质-染色质复合物和未结合的蛋白质。然后，使用抗体检测特定蛋白质是否结合到染色质上，如果有，则抗体会与结合的复合物发生反应，并在凝胶上形成明显的条带。这些条带代表蛋...
在解读 pull down 实验结果时,需要注意结果的特异性。特异性是指相互作用的蛋白质是否真正与目标蛋白质发生特定的相互作用,而不是由于非特异性结合或其他因素导致的假阳性结果。为了验证结果的特异性,可以采取以下措施: 使用多个独立的抗体或亲和剂来捕获目标蛋白质,以确保结果的一致性。
首先是input组，input组为阳性对照组，既未经pull down处理的试验组。为了表明实验体系没有问题。先看inp...
GST pull-down:原核纯化蛋白与真核蛋白在试管内发生生化反应互作的结果,只要互作蛋白间具有相互结合的结构域基础即可实验证明。Co-IP实验:细胞内高表达目的蛋白,并通过IgG球珠-抗体-蛋白复合物体系,分离出互作的蛋白复合物,是细胞内的体内反应结合。太太太详细了!Co-IP实验全流程标准实操、结果解读及实验问题解决 (...
通过扩大性分析,可以在pull-down实验中发现大量潜在的RNA结合蛋白质或RNA分子。最近,通过定向密集了解并且对全基因组探针进行逐一筛 查配对拉下实验证明神经退行性疾病(如帕金森氏症和肌萎缩侧索硬化)与多个mRNAs具有相同的RNA结合伴侣。 总之,RNA pull-down实验结果分析需要根据检测模块及有关的科学问题,选取不同的方...
RNA pull-down实验是一种用于研究RNA和RNA结合蛋白质(RNA-binding proteins,RBPs)相互作用的常用技术之一。通过将RNA探针固定在固相 介质上,然后将该探针与细胞裂解液中的RNA结合蛋白反应,最终将结合到RNA上的蛋白质通过特定的方法进行检测。 当进行RNA pull-down实验时,可以根据不同的需求选择不同的下游检测方法。
pull down 是检验胞外环境下两种蛋白相互作用。一般原核表达纯化出一种蛋白，吸附在柱子上，用它拉细胞里另一种蛋白。ip是检验胞内环境下两种蛋白的作用，转染的时候是双转。
Input部分检测未经过GST pull-down处理的样本,也是一种阳性对照。Input部分有三张WB结果: GAPDH代表以GAPDH抗体(anti-GAPDH)检测样本中GAPDH蛋白水平(GAPDH和Tubulin一样,都是常用的内参蛋白),表明四个样本蛋白水平一致; GST-ARF6代表以GST-ARF6抗体(文中采用的anti-ARF6)检测样本中重组蛋白GST-ARF6水平;其中第4...