GST pull down+GST IB组:表示GST pull down实验后用GST进行免疫印迹。发现三组均有条带,表明GST pull down实验体系可以正常发挥功能,也表明各组体系中含有GST相关的组分。 Input + YFP IB组:表示不经过GST pull down实验,直接对实验前各组的混合体系用YFP进行免疫印迹,是阳性对照组表明各组有YFP相关组分。 6、...
实验组GST-pull down第三列的实验结果可以看出KU-HIS,GST的条带中只检测到了GST,说明KU-HIS没有连接到亲和纯化柱上而被洗脱掉了。而在第四列的实验结果可以分别检测到GST与HIS 标签说明KU与TOP6发生了相互作用使得在条带中分别检测到了GST与HIS标签。
在生物研究中,GST pull-down实验是一种常用的筛选和鉴定蛋白质间相互作用的技术。通过此项实验,我们可以将目标蛋白质与它可能的互作伙伴隔离,并进行进一步的分析,例如使用质谱技术进行蛋白质质谱鉴定。在解读GST pull-down质谱分析结果时,有几个重要的参数需要关注。一、谱图匹配得分(Spectrum Match Score)谱图...
GST pulldown实验是一种常用的蛋白质相互作用分析方法,通过将GST标签融合蛋白与目标蛋白质进行结合,并利用GST标签进行纯化,最终检测目标蛋白质与与其相互作用的蛋白质的存在和互作关系。在进行GST pulldown实验后,需要对实验结果进行分析,以确定目标蛋白和与其相互作用的蛋白的存在和互作关系。 首先,需要进行SDS-PAGE凝胶...
🧐如何解读GST-pulldown结果? 🔍 GST-pulldown实验是一种强大的技术,用于研究蛋白质间的相互作用。通过这个实验,我们可以发现与已知蛋白质有相互作用的未知蛋白质。 💡 实验的基本原理是:将诱饵蛋白与GST标签融合,并通过细菌表达系统进行纯化。然后,将猎物蛋白的溶液与这些GST融合蛋白混合。如果猎物蛋白与诱饵蛋白...
可以看见GST pull-down实验结果图,与CoIP实验非常类似,主要也分为两部分: Input部分检测未经过GST pull-down处理的样本,也是一种阳性对照。Input部分有三张WB结果: GAPDH代表以GAPDH抗体(anti-GAPDH)检测样本中GAPDH蛋白水平(GAPDH和Tubulin一样,都是常用的内参蛋白),表明四个样本蛋白水平一致; ...
GST作为阴性对照,其拉下目的蛋白的量为0%。input作为阳性对照,含有目的蛋白100%。实验组使用GST-Atrogin-1-wt,在严格控制反应蛋白量的情况下,可以观察到其作用的强弱。在这次实验中,通过GST pull down技术,可以有效地验证GST-Atrogin-1-wt和β-catenin之间的相互作用。具体来说,实验包括两部分,...
可以看见GST pull-down实验结果图,与CoIP实验非常类似,主要也分为两部分: Input部分检测未经过GST pull-down处理的样本,也是一种阳性对照。Input部分有三张WB结果: GAPDH代表以GAPDH抗体(anti-GAPDH)检测样本中GAPDH蛋白水平(GAPDH和Tubulin一样,都是常用的内参蛋白),表明四个样本蛋白水平一致; ...
GST pull down实验结果怎么看啊 这张图的主要目的是为了证明GST-Atrogin-1-wt(野生型)和β-catenin在体外的相互作用, 上图是考马斯亮蓝染色的图,看划线的解说,说明实验中是用GST bead与纯化的GST蛋白或GST-Atrogin-1-wt共同孵育,用孵育后的bead来拉裂解液中的β-catenin 下图免疫印迹的,也就是western blot的...