GST pull-down:一般用于体外实验,因为诱饵蛋白是需要加上GST标签的重组蛋白,所以是非生理状态下的验证,蛋白质的结构和形式可能与天然状态下存在一定差异,一般用于体外验证两个已知蛋白的直接相互作用。 在实验难度上,重组诱饵蛋白一般采用原核表达体系,有高效的商业化载体(真核表表达体系也可以做,但需要找到合适的载体)...
可以看见GST pull-down实验结果图,与CoIP实验非常类似,主要也分为两部分: Input部分检测未经过GST pull-down处理的样本,也是一种阳性对照。Input部分有三张WB结果: GAPDH代表以GAPDH抗体(anti-GAPDH)检测样本中GAPDH蛋白水平(GAPDH和Tubulin一样,都是常用的内参蛋白),表明四个样本蛋白水平一致; GST-ARF6代表以GST-...
从两者的实验原理我们不难发现,GST pull-down和CoIP实验都是通过一种多组分的固相复合物将诱饵蛋白固定,随后富集靶标蛋白,从而确定靶标蛋白和诱饵蛋白互相作用的事实,整体思路是很类似的;不过由于固定诱饵蛋白的方法不同,二者在适用范围上,以及实验难度上均有差异。 GST pull-down一般用于体外实验,因为诱饵蛋白是需要...
总体而言,GST pull-down和CoIP实验都是两种比较有效的蛋白互作验证方法,有各自的优势,但也有对应的局限,如果想要拿到一个漂亮并有说服力的实验数据,最好两种实验都能验证一下~ 如果您近期想做GST pull-down和CoIP,但又没有充足的时间,不妨找我们聊聊吧~ 我们将为您提供全程技术支持,确保实验的顺利进行和结果准确...
综上所述,GST-pull down和CoIP是两种常用的蛋白质相互作用研究技术,它们在原理、目标蛋白质的选择、实验步骤、结果分析和优缺点等方面存在一些区别。研究人员可以根据具体的研究目的和实验条件选择适合的技术进行蛋白质相互作用的研究。 百泰派克生物科技--生物制品表征,多组学生物质谱检测优质服务商 ...
Co-IP结果如何看？_Co-IP（免疫共沉淀）与GSTpull-down区别Co-IP是检测分⼦间相互作⽤的常⽤技术，德泰发现有很多实验⼈员反映在查看论⽂⽂献的过程 中，遇到Co-IP实验结果图不知道如何进⾏分析。本⽂从不同的⽂献中找了四个Co-IP的结果 图，⽤案例的⽅式对如何分析Co-IP实验结果图进...
GST pull-down和co-immunoprecipitation(co-IP)都是目前常用的蛋白质交互作用检测方法,它们的区别在于: 1. GST pull-down通常用来检测大量的非特异性蛋白质与目标蛋白相互作用。GST是一种载体蛋白,可以通过将其连接到表达靶蛋白上,在混合 物中捕获与该靶蛋白有相互作用的其他蛋白质。之后,利用GST标记的固定矩阵,用于...
理论知识点看了多遍,但还是分不清IP,Co-IP,GST pull down?辉骏生物在下文除了介绍介绍IP与Co-IP区别知识要点,也将研究蛋白互作几种方法(酵母双杂交系统(Y2H),CO-IP的关系,GST-Pull Down)之间的区别以及优缺点简明扼要的收纳进来。 独角戏——IP:
免疫共沉淀(Co-IP)、GST Pull-Down与蛋白邻近标记技术各有其独特的优势和应用场景,但是也有其局限性。在某些方面这三种实验方法也是相互补充的,在进行研究时首先我们可以通过蛋白邻近标记技术来筛选互作蛋白,然后通过GST pull-down技术验证在体外蛋白质-蛋白质是否互作,最后利用免疫共沉淀(Co-IP)技术验证在体内蛋白质...
因此,Co-IP可以很好地原位反映蛋白质的真实相互作用。然而,仅使用Co-IP,我们不能确定蛋白质相互作用是直接的还是间接的。通过靶蛋白抗体免疫共沉淀后,得到一种蛋白质复合物,它不仅含有与靶蛋白直接相互作用的蛋白质。 对于GST-pull down测试,我们可以在体外改变实验条件,以消除不相关蛋白质的影响。因此,我们可以很...