Pig-a基因突变试验是以正常哺乳动物细胞Pig-a基因缺失为报告基因,以与Pig-a基因相关的细胞表面蛋白表达为检测对象的基因突变风险评价方法[10]。本研究使用L5178Y细胞开展体外Pig-a基因突变试验,该方法为课题组在国内首次建立并已完成初步方法学验证。...
大鼠和小鼠Pig-a基因突变试验历史背景数据采集 磷脂酰肌醇聚糖A类(Pig-a)基因突变试验是1种基于流式细胞术或有限稀释克隆法的检测方法 [1]。它通过检测细胞表面糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定蛋白(如CD59和CD55等)的表达水平来考察Pig-a基因突变频率,从而评价受试物对生物体的致突变性。Pig-a基因位于X染色体上,其结构...
近几年来,一项新的体内致突变试验——Pig-a基因突变试验受到广泛关注,该试验的检测终点为基因突变,且能够利用流式细胞术对人体突变细胞频率实现高通量检测。 Pig-a基因位于人类X染色体,编码N-乙酰氨基葡萄糖转移酶复合物,参与糖基磷脂酰肌醇(GPI)连接蛋白的早期合成。当Pig-a基因发生突变时,细胞不能正常合成GPI连接...
Pig-a试验可有效研究体细胞基因突变,是监管安全评估中细菌突变实验的补充。正如经合组织试验指南所述,它能很好地融入各种毒理学研究,使其成为评估致突变性和探索其他体外系统中已被识别的潜在基因毒性的重要工具。我们的研究重点是评估连续给药三天后暴露于N-亚硝基-N-乙基脲(N-Nitroso-N-Ethylurea)和苯并(a)芘(B...
2.1体外Pig-a基因突变试验 2.1.1连续(24 h)处理(无S9)细胞达对数生长期后,更换R0培养基(含1%青链霉素混合液、0.2 mg·mL-1丙酮酸钠的RPMI 1640培养基),调整细胞密度为5×105·mL-1于10 mL培养基中,分别添加不同浓度的茜素型蒽醌类化合物(茜草素...
口基因突变高通量试验方法,该试验具有较好的重复性,并提示该试验可以和 微核试验结合到同一个试验中。 【关键词】N一乙基一N一亚硝基脲;Pig-a基因突变;免疫磁珠筛选;微核;流式细胞术 中图分类号:R991 文献标识码:A 文章编号:1004—616X(2013)05—0392—04 ...
【目的】:考察体内Pig-a基因突变试验高通量方法联合微核实验和彗星实验检测化合物遗传毒性的可行性,并且结合短期或长期的一般毒性研究,探讨将基因突变、染色体断裂和DNA损伤三个不同遗传终点结合到大鼠短期或长期重复给药毒性研究中。【方法】研究采用6~7周龄SD大鼠,连续3天或28天经口灌胃临床用抗肿瘤药盐酸丙卡巴肼...
【目的】遗传毒性评估是食品和化学品安全性评价的重要组成部分,而基因突变分析是遗传毒性检测的主要内容之一.对于基因突变这一终点而言,目前还没有一项经过验证,得到公认和广泛应用的体内实验.Pig-a基因突变试验是新近发展起来的一种检测体内基因突变终点的遗传毒性试验.本研究拟对大鼠Pig-a基因突变试验方法进行优化,并...
体内Pig-a基因突变试验方法的开发国际人用药物注册技术协调会议ich新版遗传毒性指导原则的出台对体内遗传毒性检测方法的发展提出了更高的要求 体内Pig-a基因突变试验方法的开发 体内Pig-a基因突变试验方法的开发 张铭;周长慧;王庆利;常艳 【期刊名称】《世界临床药物》 【年(卷),期】2012(033)011 【摘要】In vivo ...
2.1体外Pig-a基因突变试验 2.1.1受试物短时(4 h)处理(有S9)细胞达对数生长期后,更换R0培养基(含1%青链霉素混合液、0.2 mg·mL-1丙酮酸钠的RPMI 1640培养基),调整细胞密度为5×10 5 ·mL-1于50 mL离心管中,并添加各大黄素型蒽醌类化合物,受试物质量浓度见表1,阳性对照采用B(a)P(5.0 μg·mL-1)...