LNP 生产过程中关键质量指标有粒径、PDI(polydispersity index)、包封率、Zeta 电位、制剂 mRNA 完整性和递送系统各组分含量等。 01 LNP的粒径和PDI LNP 的平均粒径和粒径分布 PDI 是 LNP 质量和各种应用适宜性的重要因素,通常通过动态光散射(DLS)进行表征。研...
LNP 生产过程中关键质量指标有粒径、PDI(polydispersity index)、包封率、Zeta 电位、制剂 mRNA 完整性和递送系统各组分含量等。 01 LNP的粒径和PDI LNP 的平均粒径和粒径分布 PDI 是 LNP 质量和各种应用适宜性的重要因素,通常通过动态光散射(DLS)进行表征。研...
动态光散射（DLS）和电泳光散射（ELS）分析测量 LNP 粒径、多分散指数（PDI）和 zeta 电位。LNP 包封效率用 RiboGreen 试剂盒测定包封效率（EE）。冷冻电镜（Cryo - EM）观察 LNP 结构。细胞实验 HeLa 细胞培养、传代和转染培养 HeLa 细胞，用 mRNA LNP 转染，24 小时后用流式细胞术检测转染效率和 eGFP 蛋白表...
高稳定性、高质量的微流控技术进行mRNA-LNP 的制备,可提供不同规格的高产量、高纯度、高性价比的 mRNA 和 mRNA-LNP 的定制化服务,可根据客户需求定制不同粒径大小的 LNP,同时提供 mRNA-LNP 的包封率、粒径、PDI、Zeta 电位等相关质量控制检测服务。
为了共同封装STING激动剂（2′3′-cGAMP）和mRNA，他们选择了阳离子脂质MC3。通过微流控技术，将带负电荷的mRNA和cGAMP与乙醇稀释的脂质混合，制备了平均粒径为91.6 nm、PDI为0.173的LNP。包封效率分别为92%（mRNA）和82%（cGAMP），且在4°C下15天内保持稳定。图 2. LNP 的制备和表征 LNP的细胞内释放依赖...
目前基于可电离阳离子的LNP系统,经处方优化和包封工艺开发,可将粒径降低至更小尺寸。耀海RNA平台制备的mRNA-LNP包封率大于90%,粒径可控制在80-100 nm,粒度分布均匀(PDI<0.10),均可达到市面高水平。详情可咨询菌菌:13380332910(微信同号) 耀海mRNA业务详情:耀海生物重磅推出mRNA科研级样品定制合成一站式解决...
具体而言，PBS中的LNP包含典型的100 nm以下的致密LNPs，100~150nm的空脂质体样结构，以及不同粒径包载水相的LNPs，其中部分水相中含有mRNA。DLS分析显示，Tris中的LNPs尽管观察到形态变化，但尺寸和PDI没有明显变化，这表明相比于PBS，Tris可能可以更大程度地抑制LNPs颗粒的聚集。与新鲜LNPs相比，HEPES中的LNPs在冻融...
PDI 的变化反映了聚集体亚群的形成,而主要群体保持稳定。总体而言,理化特性的变化似乎不会影响saRNA-DSPC-LNP细胞水平的表达效率,只会影响saRNA-DOPC/DOPE-LNP细胞水平的表达效率。这一结果表明,使用 DLS 作为配方稳定性的指标不足以解释saRNA表达水平的变化,需要用其他方法来解决这个问题,例如基于拉曼的化学成分分析...
如表1所示(节选部分代表性结果),作者利用DOE方法,设计了16种不同的LNP配方。并通过粒径大小、PDI、mRNA浓度和pKa等指标,对上述配方进行了表征与评估。同时,佐以先前优化的S2 LNP配方—可电离脂质: 胆固醇:DOPE:PEG =35:46.5:16:2.5(摩尔比)作对照。
Table 2. Cap5(ENE) vs. CAP m7GpppAmG mRNA-LNP制剂 总体制备粒径90~100nm;PDI≤0.08,包封率≥95% 3.2 细胞转染—靶蛋白表达水平高 VZV_mRNA1和VZV_mRNA2 LNP制剂10μg分别转染HEK293T细胞,转染后48hr对靶蛋白gE进行特异性抗体(ab272686)WB表达验证;结果表明,Cap5(ENE) VZVmRNA疫苗gE蛋白表达水平显著...