检测项目覆盖质粒纯度、超螺旋比例、浓度、杂质;mRNA原液完整性、加帽率、poly A尾分布、以及模板DNA、双链RNA(dsRNA)、T7 RNA聚合酶、加帽酶、2-O-甲基转移酶、DNAase I、内毒素、抗生素等工艺或产品相关残留;LNP-mRNA成品包封率、粒径、Zeta电位、LNP组分与含量,可为 mRNA 疫苗与药物研发提供更准确、更快速...
检测项目覆盖质粒纯度、超螺旋比例、浓度、杂质;mRNA原液完整性、加帽率、poly A尾分布、以及模板DNA、双链RNA(dsRNA)、T7 RNA聚合酶、加帽酶、2-O-甲基转移酶、DNAase I、内毒素、抗生素等工艺或产品相关残留;LNP-mRNA成品包封率、粒径、Zeta电位、LNP组分与含量,可为 mRNA 疫苗与药物研发提供更准确、更快速...
LNP 的平均粒径和粒径分布 PDI 是 LNP 质量和各种应用适宜性的重要因素,通常通过动态光散射(DLS)进行表征。研究表明,不同粒径的 LNP 在体内的表达部位不同:肌肉给药情况下,LNP 粒径越小,越容易向肝脏迁移呈现出肝靶向,而粒径较大的大多被留在注射部位[7]。...
如果需要摸索磷脂对LNP最终粒径的影响条件,可以配制以下浓度:8 mM(约5 mg/ml)、12 mM(约7.5 mg/ml)和16 mM(约10 mg/ml)。 备注:阳离子磷脂保存条件比较苛刻,常温下接触空气后会发生氧化变质。直接结果为超滤/透析后LNP粒径出现异常增大(如粒径增大一倍以上)。因此建议对阳离子磷脂进行分装冷冻保存,按照实际...
研究公开了三种方法制备SORT-LNP制剂的方法,包括移液管手动混合、涡旋混合和微流体混合方法。质量评估结果来看,三种方法的包封效率差别不大,对LNP-mRNA的靶向递送效率无显著差异。然而,从粒径数据来看,仅微流控包封法能够将LNP粒径控制在100 nm ...
颗粒大小是mRNA-LNP的关键质量属性,对药物载荷、稳定性、生物分布、细胞摄取、内吞溶解释放、免疫反应等方面具有重大影响。因此,开发稳健可靠的粒径分析方法,有利于满足多批次mRNA生产需求下产品质量的一致性。整体来看,动态光散射法(DLS)作为mRNA-LNP粒径检测的一种解决方案,具有快速、重复性好、准确性高的优势。因此...
这种尺寸分布的变化可能与LNP结构的重组有关，其中混合过程中产生的剪切力和空气卷入可能导致LNP之间的合并。 图2：小体积混合实验不同时间的粒径分布空气卷入的影响实验中观察到，在小体积混合过程中，由于混合器叶轮在液体中的位置较浅，导致液体表面产生显著扰动，从而引入空气。这种空气卷入可能是导致LNP尺寸分布...
最近，也有文献报道用蔗糖作为LNP颗粒的抗氧化剂。缓冲液则会影响到mRNA疫苗的长期稳定性。此外，核酶即使在-20℃甚至-70℃下也有催化活性。因此，mRNA疫苗制剂中使用的赋形剂必须不含RNA酶。2.3 LNP递送系统 LNP的粒径影响其内化、生物分布、免疫原性、降解和清除。控制LNP的粒径还可以靶向递送至特定组织和细胞。
几乎所有的 LNP 在储存过程中都显示粒径和PDI的增加。PDI 的变化反映了聚集体亚群的形成,而主要群体保持稳定。总体而言,理化特性的变化似乎不会影响saRNA-DSPC-LNP细胞水平的表达效率,只会影响saRNA-DOPC/DOPE-LNP细胞水平的表达效率。这一结果表明,使用 DLS 作为配方稳定性的指标不足以解释saRNA表达水平的变化,需...
LNP电荷性质与分布 LNP的平均粒径和粒径分布是LNP质量和各种应用适宜性的重要初始决定因素。这些特征通常通过动态光散射(DLS)进行表征。通常，LNP的最佳粒径为20−200nm，因为这个大小使LNP足够牢固以承受流体流动(如血液和淋巴)，同时允许LNP穿过间质。LNP大小通常通过改变PEG-脂质的量或混合参数(如流速和体积比)...