瀚海新酶针对 LNP 的下游纯化工艺进行了探索和优化,主要针对进口流速、跨膜压差 TMP(Trans-Membrane Pressure Drop)、膜孔径、膜面积、膜材质、中空纤维和平板膜包进行开发,工艺时间可控制在 3.5h 左右,mRNA-LNP 制剂的-80℃ 的稳定性可达 18 个月以上,可冻融 ...
除菌过滤后的mRNA原液处于无菌状态,利于mRNA原液稳定储存,用于随后的LNP包封工艺。 mRNA-LNP制剂生产 脂质纳米颗粒(LNP, lipid nanoparticle)是临床上最前沿的mRNA递送系统。截至目前,多数正在研发或获批临床的SARS-CoV-2 mRNA疫苗采用了LNP递送系统、或基于LNP的改良系统。LNP作为mRNA的递送载体有以下优点:制剂简单、...
除菌过滤后的mRNA原液处于无菌状态,利于mRNA原液稳定储存,用于随后的LNP包封工艺。 二、mRNA-LNP制剂生产 脂质纳米颗粒(LNP, lipid nanoparticle)是临床上最前沿的mRNA递送系统。截至目前,多数正在研发或获批临床的SARS-CoV-2 mRNA疫苗采用了LNP递送系统、或基于LNP的改良系统。LNP作为mRNA的递送载体有以下优点:制剂简...
研究人员发现LNP的炎症特性并不是特定部位的,他们猜测这可能是SARS-CoV-2疫苗的副作用,归因于其强大的辅助活性及其优越性,LNP的高效率递送引起较强的保护性免疫反应,确切机制还需要进一步的研究来确定。 目前对LNP递送的机制研究主要集中在保护mRNA和提高转染方面,但由2020年...
2.mRNA/LNP的制备mRNA/LNP传统的制备方法是两相混合再经均质技术(高压均质机、高压微射流)或者挤出技术(聚碳酸酯膜过滤器)控制粒径。该法制备的纳米粒形成多层结构,mRNA分子夹在同心脂质双层。该方法包封率普遍不高,并且需要高精度高专业化的设备,导致工艺放大困难。
电穿孔、基因枪等技术可实现mRNA在培养皿中的细胞间递送。要实现体内递送,必须使用安全无毒、低免疫原性的载体。近年来已发展出多种mRNA体内递送技术,比较有代表性的有脂质纳米粒(Lipid nanoparticle,LNP)、聚合物纳米粒子(Polymeric nanoparticle)和阳离子纳米乳(Cationic nanoemulsion)等。
mRNA-LNP制剂工艺流程mRNA-LNP制剂工艺的质控也至关重要。将制备好的mRNA经由微流控等设备进行脂质纳米颗粒LNP包裹,过程中通过优化总流量和流量比来获得理想的粒径尺寸,由于微流控的两相溶液分别为溶解于酸性水相的核酸以及溶解于有机相的脂类,在这样复杂的混合溶液下,需要在包裹后进行缓冲液置换来稳定纳米脂质颗粒LNP...
从工艺开发的角度来看，监测 mRNA 的完整性至关重要；从监管的角度来说，在 LNP 封装之前和成品阶段之后均要监测 mRNA 完整性。因此，从LNP 中提取 mRNA进行完整性检测是必要的质控手段。2024年1月，赛诺菲(Sanofi)团队Camille Malburet等人在Journal of Chromatography A发表文章：《mRNA extraction from lipid ...
mRNA-LNP制剂工艺的质控也至关重要。将制备好的mRNA经由微流控等设备进行脂质纳米颗粒LNP包裹,过程中通过优化总流量(TFR)和流量比(FRR)来获得理想的粒径尺寸,由于微流控的两相溶液分别为溶解于酸性水相的核酸以及溶解于有机相的脂类,在这样复杂的混合溶液下,需要在包裹后进行缓冲液置换来稳定纳米脂质颗粒LNP结构,确...
mRNA制剂的主要工艺环节包括mRNA的包封/装载、复合物纯化、除菌过滤、无菌灌装等,如下图。整个制剂工艺的核心挑战在于递送系统的选择以及mRNA的包封/装载,其余步骤采用的是现有成熟工艺。以当前最主流的脂质纳米颗粒(LNP)载体为例,仅ZL相关问题,就足够头疼。