将制备好的mRNA经由微流控等设备进行脂质纳米颗粒LNP包裹,过程中通过优化总流量和流量比来获得理想的粒径尺寸,由于微流控的两相溶液分别为溶解于酸性水相的核酸以及溶解于有机相的脂类,在这样复杂的混合溶液下,需要在包裹后进行缓冲液置换来稳定纳米脂质颗粒LNP结构,确认去除产品中残留的有机溶剂。 mRNA包裹后续工艺一...
将制备好的mRNA经由微流控等设备进行脂质纳米颗粒LNP包裹,过程中通过优化总流量和流量比来获得理想的粒径尺寸,由于微流控的两相溶液分别为溶解于酸性水相的核酸以及溶解于有机相的脂类,在这样复杂的混合溶液下,需要在包裹后进行缓冲液置换来稳定纳米脂质...
mRNA 的稳定性和完整性对于其功能的发挥至关重要,LNP 作为 mRNA 的载体,通过特定的技术手段将 mRNA 包裹在其中,以保护 mRNA 不受体内酶的降解,同时帮助 mRNA 有效地进入细胞,如果 mRNA 在 LNP 中发生降解,将会影响其编码蛋白质的...
除菌过滤后的mRNA原液处于无菌状态,利于mRNA原液稳定储存,用于随后的LNP包封工艺。 mRNA-LNP制剂生产 脂质纳米颗粒(LNP, lipid nanoparticle)是临床上最前沿的mRNA递送系统。截至目前,多数正在研发或获批临床的SARS-CoV-2 mRNA疫苗采用了LNP递送系统、或基于LNP的改良系统。LNP作为mRNA的递送载体有以下优点:制剂简单、...
LNP微流控制备工艺 脂质纳米粒制备工艺的优化是一个多因素、多参数的复杂过程,涉及材料选择、工艺参数调整、以及最终产品性能评价等多个方面。 LNP制备流程及工艺过程质量参数 脂质纳米粒制备过程中,各脂质组分的摩尔比决定了 LNP 的组成,并影响其粒径、PDI 和功效。由于 PEG -脂质能够抑制 ApoE 与 LNP 的结合,过...
mRNA-LNP制剂工艺流程 mRNA-LNP制剂工艺的质控也至关重要。将制备好的mRNA经由微流控等设备进行脂质纳米颗粒LNP包裹,过程中通过优化总流量(TFR)和流量比(FRR)来获得理想的粒径尺寸,由于微流控的两相溶液分别为溶解于酸性水相的核酸以及溶解于有机相的脂类,在这样复杂的混合溶液下,需要在包裹后进行缓冲液置换来稳定...
mRNA的制备工艺 到目前为止,业界进行mRNA制备的主要工艺路线如图所示,主要包括:质粒制备与线性化 ->体外转录->加帽加性-> mRNA纯化->mRNA-LNP制备->LNP纯化->LNP除菌过滤->制剂灌装。本文主要讨论后段工艺,即mRNA-LNP制备、纯化及除菌过滤过程中需要考虑的工艺要素。
对于mRNA来说,若要有效发挥其功效,其mRNA递送系统是重中之重。影响mRNA递送系统的因素有很多,翻译的效率、佐剂性、剂量等等。从早前的鱼精蛋白作为递送载体到现在的脂质纳米颗粒(LNP)递送载体,mRNA的载体技术取得了飞跃式的发展。 目前临床试验中的所有mRNA递送系统均为脂质纳米颗粒,该结构图如图8所示。已上市的...
转录后再经Seplife Oligo dT 亲和层析纯化,纯化后在加帽酶的作用下,mRNA经过加帽反应,反应后再次经Seplife Oligo dT亲和层析纯化,即完成了mRNA的制备,mRNA在经LNP包被(如图11)就完成mRNA疫苗的制备。 图11:mRNA LNP包被 mRNA纯化 图12:蓝晓科技mRNA纯化工艺过程 ...
电穿孔、基因枪等技术可实现mRNA在培养皿中的细胞间递送。要实现体内递送,必须使用安全无毒、低免疫原性的载体。近年来已发展出多种mRNA体内递送技术,比较有代表性的有脂质纳米粒(Lipid nanoparticle,LNP)、聚合物纳米粒子(Polymeric nanoparticle)和阳离子纳米乳(Cationic nanoemulsion)等。