2025年3月19日,上海交通大学医学院附属仁济医院马雪云、夏强、万平团队发表于Journal of Nanobiotechnology期刊上题为“Influence of salt solution on thephysicochemical properties and in vitro/in vivo expression of mRNA/LNP”的论文,研究首...
mRNA-LNP的制备是疫苗递送系统的关键环节。将mRNA封装在LNP中,以保护mRNA免受降解,并促进其通过内吞/吞噬途径进入细胞。本期文章将继续分享mRNA-LNP的制备流程,包括含、RNA的水相样品准备和微流控法包封mRNA-LNP。 7.1 LNP脂质配制: LNP的脂质组分是影响其性能的关键因素之一。常用的LNP配方包括可电离脂质、磷脂DS...
实验方案:微流控混合方式制备包裹mRNA的脂质纳米颗粒(mRNA-LNP的制备)(版本:V3.1.2) 实验目的: 参照Moderna、BioNtech 和 Alnylam 的新冠疫苗配方,以SM102、ALC-0315、MC3为主要阳离子脂质制备包载 mRNA 的脂质纳米颗粒(lipid nanoparticles, LNPs)。 实验原理: ALC-0315、 MC3、和 SM102 是三种可用于人体的脂质...
对制备的LNP包封mRNA的效果进行测定。 实验原理: Quant-iT™RiboGreen®RNA试剂是一种超灵敏的荧光核酸染色剂,可检测溶液中1-200 ng的核酸,这种核酸染料无法透过LNP,因此只有游离的未被LNP包载的核酸可以被结合。Triton-100作为一种表面活性剂常被用做破乳剂,使用1%的Triton-100处理获得的LNP-mRNA可以使包载的...
常见LNP制备方法包括乙醇注射法、脂质体挤出法、薄膜水化法、纳米沉淀法、冲击射流式混合法以及微流控混合法等,其中,微流控混合法由于其高包封率,LNP粒径、单分散度(PDI)等核心指标高度可控以及良好的重复性,同时相对简便快速,条件温和,同时...
同时,mRNA-LNP的制备也涉及到一些特定步骤。例如,在脂质体法制备过程中,需要先将磷脂等成分溶解在有机溶剂中,然后通过旋转蒸发等方法去除有机溶剂,再将其与mRNA溶液混合,通过超声或高压匀质等方法制备成脂质体。之后,再通过挤出或其他方法制备成均匀的mRNA-LNP。 具体制备方法及步骤可能会因实际需求和配方进行调整,...
LNP制备,mRNA-LNP,脂质体纳米颗粒制备 一、使用LNP-B0芯片按照Moderna或者Pfizer的公开配方制备mRNA-LNP,DLS测量出现两个峰,一个小于100 nm,另外一个峰大于1000 nm的峰,并且PDI大于0.2以上,应该如何处理? 答:出现这种情况一般有三个原因: 1. 进行DLS测量时测量杯壁上有划痕,对于多次反复重复使用,并反复用吸水纸...
LNP制备方法很多,包括乙醇注入法、脂质体挤出法、薄膜水化法、纳米沉淀法、冲击射流式混合法以及微流控混合法等。其中,微流控混合法由于其高包封率,LNP粒径、单分散度(PDI)等核心指标高度可控性以及良好的重复性,已经成为目前临床前研究的首选方法。 德泰生物mRNA脂质纳米粒制备系统,采用微流控技术,芯片采用316L材质...
目前,微流控混合法制备 mRNA-LNP 存在材料浪费问题。研究人员开展 mRNA-LNP 后封装法研究,用微流控或手动移液法将 mRNA 封装进预形成囊泡(PFVs)。结果显示新方法所得 mRNA-LNP 性能与传统法相似,且适用多种脂质、mRNA 和微流控系统,为制备小体积 mRNA-LNP 提供经济方案。