这种脂质-mRNA加合物无法采用毛细管电泳（CE）鉴定，但是，在IP-RP HPLC色谱图上表现为独特的晚洗脱峰(LP)，与mRNA主峰形成鲜明对比。这项研究找到了之前被忽略的一项非常重要的质量监控参数：脂质-mRNA加合物含量。必须通过原材料控制、制造工艺参数、配方设计和 LNP 储存条件来减轻脂质-mRNA加合物反应的发生。同时...
他们通过反相离子对高效液相色谱(IP-RP HPLC)鉴定出脂质与mRNA发生加合反应生成的一类杂质,这种杂质通过常规mRNA分析手段无法检测到,由源自可电离阳离子脂质的降解成分添加到碱基或者核糖上引起。
他们通过反相离子对高效液相色谱(IP-RP HPLC)鉴定出脂质与mRNA发生加合反应生成的一类杂质,这种杂质通过常规mRNA分析手段无法检测到,由源自可电离阳离子脂质的降解成分添加到碱基或者核糖上引起。
他们通过反相离子对高效液相色谱(IP-RP HPLC)鉴定出脂质与mRNA发生加合反应生成的一类杂质,这种杂质通过常规mRNA分析手段无法检测到,由源自可电离阳离子脂质的降解成分添加到碱基或者核糖上引起。
这种脂质-mRNA加合物无法采用毛细管电泳(CE)鉴定,但是,在IP-RP HPLC色谱图上表现为独特的晚洗脱峰(LP),与mRNA主峰形成鲜明对比。这项研究找到了之前被忽略的一项非常重要的质量监控参数:脂质-mRNA加合物含量。 必须通过原材料控制、制造工艺参数、配方设计和 LNP 储存条件来减轻脂质-mRNA加合物反应的发生。同时,也...
文章分别对三家不同供应商的eGFP mRNA利用离子对反相液相色谱法(Ion-Pair Reversed-Phase Liquid Chromatography,IP-RPLC)与毛细管凝胶电泳(Capillary Gel Electrophoresis, CGE)进行了纯度分析,分析方法和程序如表1所示。其中,为了在IP-RPLC中实现mRNA的高效分离,文中使用了含有4 μm大孔球形聚合物树脂的DNAPac RP...
文章分别对三家不同供应商的eGFP mRNA利用离子对反相液相色谱法(Ion-Pair Reversed-Phase Liquid Chromatography,IP-RPLC)与毛细管凝胶电泳(Capillary Gel Electrophoresis, CGE)进行了纯度分析,分析方法和程序如表1所示。其中,为了在IP-RPLC中实现mRNA的...
本次小编分享了能够简单、稳定地分析mRNA poly(A)尾长的IP-RP-LC/UV⽅法和SEC-UV方法。基于ACQUITY Premier SEC 250 Å蛋白分析专用柱进行poly(A)尾长分析,使用寡核糖核苷酸合成标准品进行SEC校准,结果在30-150 nt长度范围内呈线性。使用ACQUITY Premier BEH C18 300 Å寡核苷酸分析专用柱可以基于IP-RP-LC...
这些属性可以通过一系列方法进行监测,例如指南中所述的 IP RP-HPLC。该方法还可以与质谱联用,以提供更多的组成和结构细节。常见方法使用非特异性核糖核酸酶,例如 RNAse H。使用引导引物将酶靶向尾部上游的特定区域。RNAse H 只会切割双链 RNA。因此,从上游引物引导位点产生短寡核苷酸,产生含有尾部的区域,可以对尾部...
星耀小TIP:2022年美国药典(USP)制定的《mRNA疫苗质量分析方法》草案中,基于RNase H切割作用,推荐RNase H与离子对反相高效液相色谱(IP-RP-HPLC),用于mRNA加帽率的测定:①使用RNase H特异性切割mRNA,以产生带或不带帽结构的5’端单链寡核苷酸序列;②通过IP-RP-HPLC分离寡核苷酸,使用C18柱、流动相A(0.1 mM冰醋酸...