(2)注意转录方向,输入基因转录起始位点上游2000bp区域,点击Update View,得到的序列为基因的启动子区域,后续按照普通qPCR引物设计原则设计引物即可。 五、MeRIP-qPCR RNA甲基化免疫共沉淀技术(methylated RNA immunoprecipitation,MeRIP )是利用免疫共沉淀的方法即用抗RNA甲基化抗体与被随机打断的RNA片段进行孵育,下拉得到有...
qPCR引物设计流程与普通PCR一致,但相较于普通PCR的引物设计原则,qPCR更为严格,具体如下: 1. 引物的退火温度要高,一般要在60℃以上; 2. 引物的产物大小不要太大,一般在80-250bp之间都可; 3. 对于定量PCR来说,特别是在使用SYBR Green的情况下,引物二聚体的存在对结果的干扰较大,所以在选择引物时要尽量避免...