最终完成Cre-loxP系统条件性靶基因小鼠研制的操作，通常需要通过floxed小鼠与相应Cre小鼠间的两步遗传交配繁殖过程。第一步交配，X基因Cre杂合小鼠（X基因Cre/+）与Y基因 floxed杂合小鼠（Y基因lox/+，即CKO打靶Y基因)，或Y基因 floxed纯合小鼠（Y基因lox/lox）交配，获得X基因Cre/+; Y基因lox/+ 后代杂合小鼠。...
Cre小鼠,就是体内带有Cre重组酶基因的小鼠。Cre是一个细菌的蛋白,可以切割带LoxP序列的DNA,LoxP的不同排列也会导致不同的结果。而Flox小鼠,则是在某个基因的两边都插入了loxP 位点的小鼠。 当Cre小鼠和 Flox小鼠“相遇”时,Cre酶会剪切 FloX小鼠中那个被loxP 位点包围的基因,从而实现对该基因的敲除或修改。这样,...
这里所说的设计主要是 Flox 小鼠的设计。所谓条件性敲除,是说除了特定细胞外,其它细胞里面没有任何的基因表达异常。一般情况下,不要在第一个外显子前面放置 LoxP 序列。因为第一个外显子前面一般是启动子。放置 LoxP 序列有可能会破坏或改变启动子活性。 ...
Cre-loxp介导基因小鼠具备时间和空间特异性操控基因的独特能力,条件性基因敲除小鼠是Cre-loxp系统应用之一。相比于全身敲除小鼠,条件性基因敲除小鼠的优点是实现了目的基因空间和时间特异性激活,即在特定的组织细胞或细胞发育的特定阶段敲除或激活目的基因。然而,在条件性敲除小鼠使用过程中需要注意的是,条件性敲除小鼠并不...
Cre-loxP系统构建KO小鼠的优势 可以利用组织特异性启动子特异性控制Cre在特定组织的表达,以实现在特定组织细胞中对目的基因的敲除或改造,更好的规避全身敲除小鼠的胚胎致死现象。 高效性:Cre重组酶与具有loxP位点的DNA片段形成二聚体后,可提供足够的能力引发之后...
Cre鼠常用于与flox鼠杂交进行条件性基因敲除，也有研究将其用于切割位于报告基因前的终止序列，以达到荧光标记特定细胞的目的。改造并优化Cre，结合细胞/组织特异性的调控元件，可实现时空条件性靶基因敲除/表达。赛业生物药物筛选评价小鼠模型平台可为研究人员提供Cre工具鼠、诱导型Cre工具鼠、荧光标记模型等多类型工具鼠...
制备条件性基因敲除小鼠需要Floxed小鼠(即目的基因被LoxP序列锚定的小鼠)和Cre鼠两种小鼠。Cre小鼠即Cre重组酶在小鼠体内特定组织或细胞表达的小鼠,其Cre 基因的表达受控于一个特异性启动子,该启…
就Cre/LoxP系统的特点,以及在转基因小鼠上的 应用策略,扼要综述如下. 组酶可分为Int家族(integrasefamily)和 resolvase2invertasefamily.Cre是来源于P1噬菌体 cre基因所编码的一个38ku蛋白,属于Int家族. 它可识别P1基因组上由34bp核苷酸序列构成的 称为LoxP的特异靶位点,并根据LoxP的方向性, ...
而你如果分别有两种老鼠，其实配很快的。另外将这两个东西分开更大好处在于利于自由组合研究，比如，cre有X种不同脏器的，而loxp你可以做Y种不同基因的，这样你就可以自由组合做X乘以Y种老鼠，也就是可以任意在不同组织敲不同基因，方便又自由，可以极大拓展你可以研究的领域 再者，另外一种比较奇葩的...
[摘要]目的:通过Cre-LoxP技术构建转基因小鼠，示踪全脑7-氨基丁酸（G A B A)能神经元分布及形态。方法：使用C57BU6J-Gad2em l(m E s.iC r°-pA)w小鼠（Gad2-ireS-cre 小鼠）与B6/JGpt-Hll™,cin(C A G—U x P-z'G™~G pt小鼠（B6-G/R小鼠）杂交产生G acE'dT^V non-Gac^1^"子代...