1肝脏特异性基因敲除:Cre小鼠:携带肝脏特异性启动子(Alb)的Cre基因;Flox小鼠:目标基因两侧插入loxP位点。这样可以使目标基因仅在肝脏被敲除,其他组织不受影响。比如:Alb-CreERT2小鼠 2神经系统研究:Cre小鼠:以Nestin(神经元特异性启动子)驱动Cre酶表达;Flox小鼠:携带与神经...
最终完成Cre-loxP系统条件性靶基因小鼠研制的操作，通常需要通过floxed小鼠与相应Cre小鼠间的两步遗传交配繁殖过程。第一步交配，X基因Cre杂合小鼠（X基因Cre/+）与Y基因 floxed杂合小鼠（Y基因lox/+，即CKO打靶Y基因)，或Y基因 floxed纯合小鼠（Y基因lox/lox）交配，获得X基因Cre/+; Y基因lox/+ 后代杂合小鼠。...
Cre-loxP 主要用于基因敲除，但它也会根据 loxP 位点的取向和位置诱导两个 loxP 位点之间的 DNA 反转和易位[1]。2常用的 Cre-loxP 诱变系统 图 2. Cre-loxP 诱变系统的原理[1]。 ▐ Cre-ER (Tam) 系统Cre-ER (Tam) 系统，也称为他莫昔芬 (Tamoxifen) 诱导的 Cre 系统，是 Cre-LoxP 系统中最为...
Cre-loxP 主要用于基因敲除,但它也会根据 loxP 位点的取向和位置诱导两个 loxP 位点之间的 DNA 反转和易位[1]。 02 常用的 Cre-loxP 诱变系统 图2. Cre-loxP 诱变系统的原理[1]。 ▐ Cre-ER (Tam) 系统 Cre-ER(Tam)系统,也称为他莫昔芬 (Tamoxifen)诱导的 Cre 系统,是 Cre-LoxP 系统中最为常用...
应用Cre/loxP进行条件性基因敲除的原则 如何应用Cre-loxP系统来获取特定的条件基因敲除小鼠呢? 首先将loxP序列重组到需要删除DNA区域两端,该区域一般被称为flox区,获得的小鼠称为flox小鼠。Flox小鼠基因功能正常,可与在特定细胞或组织或特定时期表达Cre重组酶的Cre工具鼠交配后获得各种时空特异性基因敲除小鼠。
最终完成Cre-loxP系统条件性靶基因编辑小鼠研制的操作,通常需要通过floxed小鼠与相应Cre小鼠间的两步遗传交配繁殖过程。第一步交配,X基因Cre杂合小鼠(X基因Cre/+)与Y基因 floxed杂合小鼠(Y基因 lox/+,即CKO打靶Y基因),或Y基因 floxed纯合小鼠(Y基因lox/lox)交配,获得X基因Cre/+; Y基因lox/+ 后代杂合小鼠。第...
如果在相应细胞/组织内特异性表达Cre重组酶, 且细胞/组织内也含两个loxP位点序列的floxed靶区域,则可使Cre-loxP系统的重组作用,局限于特定细胞或组织,实现体内靶基因特异性敲除或表达的目的。T细胞特异性Cre转基因小鼠最先构建,为条件性...
0Cre-loxP系统的应用 通过Cre-loxP系统，我们能够在小鼠体内实现对基因的时空特异性调控，无论是表达还是敲除。这一过程需要构建两种特定的小鼠模型。首先，需要创建Cre小鼠，其中的Cre重组酶由特定的启动子驱动，从而确保在特定的细胞、组织或全身范围内表达。启动子或增强子的选择将决定Cre重组酶的活性范围和强度。其次...
二、应用Cre-loxP位点特异性重组系统,实现小鼠条件性靶基因功能研究 三、不同Cre小鼠模型构建策略及方法特点 1. 质粒表达载体的转基因Cre小鼠模型: 2. 定点敲入Cre小鼠模型: 3. BAC转基因Cre小鼠模型: 4. 安全位点敲入Cre小鼠模型: 四、为什么要构建诱导性调控CreERT小鼠模型及其基本特征 五、Cre转基因小鼠模型中...
CreERT小鼠的原理是基于Cre-loxP重组系统,并结合了雌激素受体(ER)的配体结合域突变体(ERT)来实现对基因重组的时空特异性调控,具体如下: Cre-loxP重组系统基础:Cre-loxP系统源自P1噬菌体,主要由Cre重组酶和loxP位点组成。Cre重组酶是一种由343个氨基酸组成的蛋白,loxP位点是一段长34bp的DNA序列,包含两个13bp的反...