mRNA-LNP 制备是 mRNA 疫苗从纯化 mRNA(原液)到成品(制剂)的生产过程的关键步骤,涉及脂质制备或筛选、mRNA 包封 / 装载、纯化等工序,目前最常用的方法是将水相和脂质成分快速混合的微流控法。 mRNA-LNP 的应用进展 脂质纳米颗粒(lipid nanoparticle,LNP)通常由多种脂质组成,用于包封 mRNA 和增强其稳定性的递送系...
实验目的对制备的 LNP 包封 mRNA 的效果进行测定。 实验原理 Quant-iT™ RiboGreen® RNA 试剂是一种超灵敏的荧光核酸染色剂 ,可检测溶液中 1-200 ng 的核酸 ,这种核酸染料无法透过 LNP ,因此只有游离的未被 LNP 包载的核酸可 以被结合。Triton-100 作为一种表面活性剂常被用做破乳剂,使用 1%的 Triton-...
对制备的LNP包封mRNA的效果进行测定。 实验原理: Quant-iT™RiboGreen®RNA试剂是一种超灵敏的荧光核酸染色剂,可检测溶液中1-200 ng的核酸,这种核酸染料无法透过LNP,因此只有游离的未被LNP包载的核酸可以被结合。Triton-100作为一种表面活性剂常被用做破乳剂,使用1%的Triton-100处理获得的LNP-mRNA可以使包载的...
mrna-lnp制备mRNA-LNP的制备方法有多种,包括脂质体挤出法、薄膜水化法、纳米沉淀法、微流控以及冲击射流式混合法等。不同的制备方法有各自的优势与缺陷,制备出的LNP能否保持其囊泡均匀稳定,成了评价LNP质量的重要指标。 同时,mRNA-LNP的制备也涉及到一些特定步骤。例如,在脂质体法制备过程中,需要先将磷脂等成分...
mRNA-LNP制备的CAR-NK细胞的 体内肿瘤抑制活性 为了测试人CAR-NK细胞的体内活性,我们在免疫缺陷的NSG小鼠模型中使用了Nalm-6-荧光素酶白血病癌细胞。在第 0 天,将 1 × 10 5 个 Nalm-6-luc+ 细胞静脉注射到 NSG 小鼠中。然后,在第...
一、微流控lnpmrna的概念。 微流控lnpmrna是一种基于微流控技术制备的核糖核酸(mrna)载体。它利用微流控芯片的微细管道结构,将mrna与脂质体进行有效的结合,并形成具有良好稳定性和高透明度的lnpmrna载体颗粒。 二、微流控lnpmrna的制备步骤。 1.原料准备:包括mrna、脂质体、辅助配体等。 2.微流控芯片设计:根...
耀海生物采用的Ignite™作为mRNA脂质纳米颗粒制备系统,它是PNI(Precision NanoSystems)的Nanoassemblr®平台推出的微流控混合仪,适用于LNP、脂质体等纳米结构的制备,可以实现纳米颗粒组分在纳升水平以毫秒混合,保证混合效果。通过结合优化、精确...
步骤2_装载芯片——实验方案:微流控混合方式制备mRNA脂质纳米颗粒(LNP) 2196 -- 0:21 App 微流控应用实例:高通量微液滴制备 2558 -- 0:10 App 微流控应用实例:水油气(G/O/W)双乳化液滴、空心薄壳微球制备 2973 -- 0:10 App PLGA(聚乳酸-羟基乙酸)微球载体制备 4161 -- 4:51 App FluidicLab-...
LNP制备方法很多,包括乙醇注入法、脂质体挤出法、薄膜水化法、纳米沉淀法、冲击射流式混合法以及微流控混合法等。其中,微流控混合法由于其高包封率,LNP粒径、单分散度(PDI)等核心指标高度可控性以及良好的重复性,已经成为目前临床前研究的首选方法。 德泰生物mRNA脂质纳米粒制备系统,采用微流控技术,芯片采用316L材质...